ରୋଗୀ ସିରମର ଉଚ୍ଚ-ରିଜୋଲ୍ୟୁସନ ମାସ୍ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରୋମେଟ୍ରିକ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ ବ୍ୟବହାର କରି ଉଚ୍ଚ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ସହିତ ସୌମ୍ୟ ଏବଂ ମାଲିଗ୍ନାଣ୍ଟ ପଲ୍‌ସୁନା ନୋଡୁଲ୍‌ଗୁଡ଼ିକୁ ପୃଥକ କରୁଥିବା ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ସ।

ଗଣିତ ଟୋମୋଗ୍ରାଫି (CT) ଦ୍ୱାରା ଚିହ୍ନଟ ପଲ୍‌ଫୁସନା ନୋଡୁଲ୍‌ର ଭିନ୍ନକ୍ଷମ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କ୍ଲିନିକାଲ୍ ଅଭ୍ୟାସରେ ଏକ ଚ୍ୟାଲେଞ୍ଜ ହୋଇ ରହିଛି। ଏଠାରେ, ଆମେ ସୁସ୍ଥ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ, ସୌମ୍ୟ ଫୁସଫୁସ ନୋଡୁଲ୍ ଏବଂ ପର୍ଯ୍ୟାୟ I ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମା ସମେତ 480 ସିରମ୍ ନମୁନାର ବିଶ୍ୱସ୍ତରୀୟ ମେଟାବୋଲୋମ୍‌କୁ ବର୍ଣ୍ଣିତ କରୁଛୁ। ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମା ଅନନ୍ୟ ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ ପ୍ରୋଫାଇଲ୍ ପ୍ରଦର୍ଶନ କରନ୍ତି, ଯେତେବେଳେ ସୌମ୍ୟ ନୋଡୁଲ୍ ଏବଂ ସୁସ୍ଥ ବ୍ୟକ୍ତିମାନଙ୍କର ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ ପ୍ରୋଫାଇଲ୍ ରେ ଉଚ୍ଚ ସମାନତା ଥାଏ। ଆବିଷ୍କାର ଗୋଷ୍ଠୀ (n = 306), ସୌମ୍ୟ ଏବଂ ମାଲିଗ୍ନାଣ୍ଟ ନୋଡୁଲ୍ ମଧ୍ୟରେ ପାର୍ଥକ୍ୟ କରିବା ପାଇଁ 27 ମେଟାବୋଲାଇଟ୍‌ର ଏକ ସେଟ୍ ଚିହ୍ନଟ କରାଯାଇଥିଲା। ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ବୈଧତା (n = 104) ଏବଂ ବାହ୍ୟ ବୈଧତା (n = 111) ଗୋଷ୍ଠୀରେ ବିଭେଦକ ମଡେଲର AUC ଯଥାକ୍ରମେ 0.915 ଏବଂ 0.945 ଥିଲା। ପଥ ବିଶ୍ଳେଷଣ ସୌମ୍ୟ ନୋଡୁଲ୍ ଏବଂ ସୁସ୍ଥ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ତୁଳନାରେ ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମା ସେରମ୍‌ରେ ହ୍ରାସ ପାଇଥିବା ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ସହିତ ଜଡିତ ବର୍ଦ୍ଧିତ ଗ୍ଲାଇକୋଲାଇଟିକ୍ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍‌ ପ୍ରକାଶ କରିଥିଲା ​​ଏବଂ ପରାମର୍ଶ ଦେଇଥିଲା ଯେ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ଗ୍ରହଣ ଫୁସଫୁସ କର୍କଟ କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ଗ୍ଲାଇକୋଲାଇସିସ୍ କୁ ପ୍ରୋତ୍ସାହିତ କରେ। CT ଦ୍ୱାରା ଚିହ୍ନଟ ହୋଇଥିବା ପଲ୍‌ଫୁସନା ନୋଡୁଲ୍ସର ବିପଦ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନରେ ଆମର ଅଧ୍ୟୟନ ସେରମ୍ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ବାୟୋମାର୍କରର ମୂଲ୍ୟକୁ ଆଲୋକିତ କରେ।
କର୍କଟ ରୋଗୀଙ୍କ ବଞ୍ଚିବା ହାରକୁ ଉନ୍ନତ କରିବା ପାଇଁ ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ରୋଗ ନିର୍ଣ୍ଣୟ ଅତ୍ୟନ୍ତ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ। ଆମେରିକାର ଜାତୀୟ ଫୁସଫୁସ କର୍କଟ ସ୍କ୍ରିନିଂ ଟ୍ରାଏଲ୍ (NLST) ଏବଂ ୟୁରୋପୀୟ NELSON ଅଧ୍ୟୟନର ଫଳାଫଳରୁ ଜଣାପଡିଛି ଯେ କମ୍-ଡୋଜ୍ କମ୍ପ୍ୟୁଟେଡ୍ ଟୋମୋଗ୍ରାଫି (LDCT) ସହିତ ସ୍କ୍ରିନିଂ ଉଚ୍ଚ-ବିପଦପୂର୍ଣ୍ଣ ଗୋଷ୍ଠୀରେ ଫୁସଫୁସ କର୍କଟ ମୃତ୍ୟୁହାରକୁ ଉଲ୍ଲେଖନୀୟ ଭାବରେ ହ୍ରାସ କରିପାରିବ1,2,3। ଫୁସଫୁସ କର୍କଟ ସ୍କ୍ରିନିଂ ପାଇଁ LDCTର ବ୍ୟାପକ ବ୍ୟବହାର ପରଠାରୁ, ଲକ୍ଷଣହୀନ ଫୁସଫୁସ ନୋଡୁଲ୍ସର ଆକସ୍ମିକ ରେଡିଓଗ୍ରାଫିକ୍ ଫଳାଫଳର ଘଟଣା ବୃଦ୍ଧି ପାଇବାରେ ଲାଗିଛି 4। ଫୁସଫୁସ ନୋଡୁଲ୍ସକୁ 3 ସେମି ବ୍ୟାସ ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ଫୋକାଲ୍ ଅସ୍ୱଚ୍ଛତା ଭାବରେ ପରିଭାଷିତ କରାଯାଇଛି 5। ଆମେ ମାଲିଗ୍ନାନ୍ସିର ସମ୍ଭାବନା ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରିବାରେ ଏବଂ LDCT ରେ ଆକସ୍ମିକ ଭାବରେ ଚିହ୍ନଟ ହୋଇଥିବା ବହୁ ସଂଖ୍ୟକ ଫୁସଫୁସ ନୋଡୁଲ୍ସ ସହିତ ମୁକାବିଲା କରିବାରେ ଅସୁବିଧାର ସମ୍ମୁଖୀନ ହେଉଛୁ। CT ର ସୀମା ବାରମ୍ବାର ଅନୁସରଣ ପରୀକ୍ଷା ଏବଂ ମିଥ୍ୟା-ସକାରାତ୍ମକ ଫଳାଫଳ ଦେଇପାରେ, ଯାହା ଅନାବଶ୍ୟକ ହସ୍ତକ୍ଷେପ ଏବଂ ଅତ୍ୟଧିକ ଚିକିତ୍ସାର କାରଣ ହୋଇପାରେ6। ତେଣୁ, ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ପର୍ଯ୍ୟାୟରେ ଫୁସଫୁସ କର୍କଟକୁ ସଠିକ୍ ଭାବରେ ଚିହ୍ନଟ କରିବା ଏବଂ ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ଚିହ୍ନଟ ସମୟରେ ଅଧିକାଂଶ ମୃଦୁ ନୋଡୁଲ୍ସକୁ ପୃଥକ କରିବା ପାଇଁ ନିର୍ଭରଯୋଗ୍ୟ ଏବଂ ଉପଯୋଗୀ ବାୟୋମାର୍କର ବିକାଶ କରିବାର ଆବଶ୍ୟକତା ଅଛି 7।
ଜିନୋମିକ୍ସ, ପ୍ରୋଟିଓମିକ୍ସ କିମ୍ବା ଡିଏନଏ ମିଥାଇଲେସନ8,9,10 ସମେତ ରକ୍ତର ବ୍ୟାପକ ଆଣବିକ ବିଶ୍ଳେଷଣ (ସେରମ, ପ୍ଲାଜମା, ପେରିଫେରାଲ ରକ୍ତ ମୋନୋନ୍ୟୁକ୍ଲିୟର କୋଷ), ଫୁସଫୁସ କର୍କଟ ରୋଗ ପାଇଁ ଡାଇଗ୍ନୋଷ୍ଟିକ୍ ବାୟୋମାର୍କର ଆବିଷ୍କାରରେ ଆଗ୍ରହ ବୃଦ୍ଧି ପାଇଛି। ଏହି ସମୟରେ, ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ସ ପଦ୍ଧତିଗୁଡ଼ିକ ସେଲୁଲାର ଶେଷ ଉତ୍ପାଦଗୁଡ଼ିକୁ ମାପ କରେ ଯାହା ଅନ୍ତର୍ଜାତ ଏବଂ ବାହ୍ୟ କ୍ରିୟା ଦ୍ୱାରା ପ୍ରଭାବିତ ହୋଇଥାଏ ଏବଂ ତେଣୁ ରୋଗ ଆରମ୍ଭ ଏବଂ ଫଳାଫଳ ପୂର୍ବାନୁମାନ କରିବା ପାଇଁ ପ୍ରୟୋଗ କରାଯାଏ। ତରଳ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି-ଟାଣ୍ଡେମ୍ ମାସ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରୋମେଟ୍ରି (LC-MS) ଏହାର ଉଚ୍ଚ ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା ଏବଂ ବୃହତ ଗତିଶୀଳ ପରିସର ହେତୁ ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ସ ଅଧ୍ୟୟନ ପାଇଁ ଏକ ବ୍ୟାପକ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ପଦ୍ଧତି, ଯାହା ବିଭିନ୍ନ ଭୌତିକ ରାସାୟନିକ ଗୁଣ ସହିତ ମେଟାବୋଲାଇଟଗୁଡ଼ିକୁ କଭର କରିପାରିବ11,12,13। ଯଦିଓ ପ୍ଲାଜମା/ସେରମର ବିଶ୍ୱବ୍ୟାପୀ ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ ଫୁସଫୁସ କର୍କଟ ରୋଗ ନିର୍ଣ୍ଣୟ14,15,16,17 ଏବଂ ଚିକିତ୍ସା ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ସହିତ ଜଡିତ ବାୟୋମାର୍କରଗୁଡ଼ିକୁ ଚିହ୍ନଟ କରିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଛି, ତଥାପି ସୌମ୍ୟ ଏବଂ ମାଲିଗ୍ନାଣ୍ଟ ଫୁସଫୁସ ନୋଡୁଲ୍ ମଧ୍ୟରେ ପାର୍ଥକ୍ୟ କରିବା ପାଇଁ 18 ସେରମ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ବର୍ଗୀକରଣକୁ ବହୁତ ଅଧ୍ୟୟନ କରିବାକୁ ବାକି ଅଛି। -ବ୍ୟାପୀ ଗବେଷଣା।
ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମା ଏବଂ ସ୍କ୍ୱାମସ୍ ସେଲ୍ କାର୍ସିନୋମା ହେଉଛି ନନ୍-ସ୍ମଲ୍ କୋଷ ଫୁସଫୁସ କର୍କଟ (NSCLC)ର ଦୁଇଟି ମୁଖ୍ୟ ଉପପ୍ରକାର। ବିଭିନ୍ନ CT ସ୍କ୍ରିନିଂ ପରୀକ୍ଷା ସୂଚିତ କରେ ଯେ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମା ହେଉଛି ଫୁସଫୁସ କର୍କଟ 1,19,20,21ର ସବୁଠାରୁ ସାଧାରଣ ହିଷ୍ଟୋଲୋଜିକାଲ୍ ପ୍ରକାର। ଏହି ଅଧ୍ୟୟନରେ, ଆମେ ସୁସ୍ଥ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ, ସୌମ୍ୟ ପଲ୍ମୋନାରୀ ନୋଡୁଲ୍ସ ଏବଂ CT-ଚିହ୍ନିତ ≤3 ସେମି ସମେତ ମୋଟ 695 ସେରମ୍ ନମୁନାରେ ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ସ ବିଶ୍ଳେଷଣ କରିବା ପାଇଁ ଅଲ୍ଟ୍ରା-ପର୍ଫର୍ମାନ୍ସ ଲିକ୍ୱିଡ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି-ହାଇ-ରିଜୋଲ୍ୟୁସନ୍ ମାସ୍ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରୋମେଟ୍ରି (UPLC-HRMS) ବ୍ୟବହାର କରିଥିଲୁ। ଷ୍ଟେଜ୍ I ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମା ପାଇଁ ସ୍କ୍ରିନିଂ। ଆମେ ସେରମ୍ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ସର ଏକ ପ୍ୟାନେଲ୍ ଚିହ୍ନଟ କରିଥିଲୁ ଯାହା ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମାକୁ ସୌମ୍ୟ ନୋଡୁଲ୍ସ ଏବଂ ସୁସ୍ଥ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ତୁଳନାରେ ପୃଥକ କରିଥାଏ। ପଥ ସମ୍ମିଶ୍ରଣ ବିଶ୍ଳେଷଣରୁ ଜଣାପଡିଛି ଯେ ଅସ୍ୱାଭାବିକ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ଏବଂ ଗ୍ଲୁକୋଜ୍ ମେଟାବୋଲିଜିମ୍ ହେଉଛି ସୌମ୍ୟ ନୋଡୁଲ୍ସ ଏବଂ ସୁସ୍ଥ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ତୁଳନାରେ ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମାରେ ସାଧାରଣ ପରିବର୍ତ୍ତନ। ଶେଷରେ, ଆମେ LDCT ଦ୍ୱାରା ଚିହ୍ନଟ ହୋଇଥିବା ମାଲିଗ୍ନାଣ୍ଟ ଏବଂ ସୌମ୍ୟ ପଲ୍‌ମୋନାରୀ ନୋଡୁଲ୍ ମଧ୍ୟରେ ପାର୍ଥକ୍ୟ କରିବା ପାଇଁ ଉଚ୍ଚ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ଏବଂ ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା ସହିତ ଏକ ସେରମ୍ ମେଟାବୋଲିକ୍ ବର୍ଗୀକରଣ ସ୍ଥାପନ ଏବଂ ବୈଧ କରିଛୁ, ଯାହା ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ପାର୍ଥକ୍ୟ ନିର୍ଣ୍ଣୟ ଏବଂ ବିପଦ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନରେ ସାହାଯ୍ୟ କରିପାରେ।
ବର୍ତ୍ତମାନର ଅଧ୍ୟୟନରେ, ୧୭୪ ଜଣ ସୁସ୍ଥ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ, ସୌମ୍ୟ ପଲ୍‌ମୋନାରୀ ନୋଡୁଲ୍ସ ଥିବା ୨୯୨ ଜଣ ରୋଗୀ ଏବଂ ପ୍ରଥମ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ଫୁସ୍‌ଫୁସ୍ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମା ଥିବା ୨୨୯ ଜଣ ରୋଗୀଙ୍କଠାରୁ ଲିଙ୍ଗ ଏବଂ ବୟସ ସହିତ ମେଳ ଖାଉଥିବା ସେରମ୍ ନମୁନାଗୁଡ଼ିକୁ ପୂର୍ବବର୍ତ୍ତୀ ଭାବରେ ସଂଗ୍ରହ କରାଯାଇଥିଲା। ୬୯୫ ଜଣ ବିଷୟର ଜନସଂଖ୍ୟାଗତ ବୈଶିଷ୍ଟ୍ୟ ପରିପୂରକ ସାରଣୀ ୧ ରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି।
ଚିତ୍ର 1a ରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା ପରି, ସନ୍ ୟାଟ୍-ସେନ୍ ବିଶ୍ୱବିଦ୍ୟାଳୟ କର୍କଟ କେନ୍ଦ୍ରରେ ୧୭୪ଟି ସୁସ୍ଥ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ (HC), ୧୭୦ଟି ସୌମ୍ୟ ନୋଡୁଲ୍ସ (BN), ଏବଂ ୧୩୬ଟି ପର୍ଯ୍ୟାୟ I ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମା (LA) ନମୁନା ସମେତ ମୋଟ ୪୮୦ଟି ସିରମ୍ ନମୁନା ସଂଗ୍ରହ କରାଯାଇଥିଲା। ଅଲ୍ଟ୍ରା-ପର୍ଫର୍ମାନ୍ସ ଲିକ୍ୱିଡ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି-ହାଇ-ରିଜୋଲ୍ୟୁସନ୍ ମାସ୍ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରୋମେଟ୍ରି (UPLC-HRMS) ବ୍ୟବହାର କରି ଅଣଲକ୍ଷ୍ୟଯୁକ୍ତ ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ ପ୍ରୋଫାଇଲିଂ ପାଇଁ ଡିସ୍କଭରୀ କୋହର୍ଟ। ପରିପୂରକ ଚିତ୍ର 1 ରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା ପରି, ଏକ ବର୍ଗୀକରଣ ମଡେଲ୍ ସ୍ଥାପନ କରିବା ଏବଂ ଅଧିକ ଭିନ୍ନ ପଥ ବିଶ୍ଳେଷଣ ଅନୁସନ୍ଧାନ କରିବା ପାଇଁ LA ଏବଂ HC, LA ଏବଂ BN ମଧ୍ୟରେ ଭିନ୍ନ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ଚିହ୍ନଟ କରାଯାଇଥିଲା। ସନ୍ ୟାଟ୍-ସେନ୍ ବିଶ୍ୱବିଦ୍ୟାଳୟ କର୍କଟ କେନ୍ଦ୍ର ଦ୍ୱାରା ସଂଗୃହିତ ୧୦୪ଟି ନମୁନା ଏବଂ ଅନ୍ୟ ଦୁଇଟି ହସ୍ପିଟାଲ ଦ୍ୱାରା ସଂଗୃହିତ ୧୧୧ଟି ନମୁନା ଯଥାକ୍ରମେ ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ଏବଂ ବାହ୍ୟ ବୈଧକରଣର ଶିକାର ହୋଇଥିଲା।
ଅଲ୍ଟ୍ରା-ପର୍ଫମାନ୍ସ ଲିକ୍ୱିଡ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି-ହାଇ-ରିଜୋଲ୍ୟୁସନ୍ ମାସ୍ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରୋମେଟ୍ରି (UPLC-HRMS) ବ୍ୟବହାର କରି ଗ୍ଲୋବାଲ୍ ସେରମ୍ ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ସ ବିଶ୍ଳେଷଣ କରିଥିବା ଡିସ୍କଭରୀ କୋହର୍ଟରେ ଏକ ଅଧ୍ୟୟନ ଜନସଂଖ୍ୟା। b ଅଧ୍ୟୟନ କୋହର୍ଟରୁ 480 ସେରମ୍ ନମୁନାର ମୋଟ ମେଟାବୋଲୋମର ଆଂଶିକ ସର୍ବନିମ୍ନ ବର୍ଗ ଡିସକ୍ରିମଣ୍ଟ ବିଶ୍ଳେଷଣ (PLS-DA), ସୁସ୍ଥ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ (HC, n = 174), ସୌମ୍ୟ ନୋଡୁଲ୍ସ (BN, n = 170), ଏବଂ ପର୍ଯ୍ୟାୟ I ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମା (ଲସ୍ ଆଞ୍ଜେଲସ୍, n = 136) ସମେତ ଆଗ୍ନେୟଗିରି ଗ୍ରାଫିକରେ ଦର୍ଶାଯାଇଥିବା ଦୁଇଟି ଗୋଷ୍ଠୀରେ ଉଲ୍ଲେଖନୀୟ ଭାବରେ ଭିନ୍ନ ପ୍ରଚୁରତା ସହିତ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ (ଦୁଇ-ଟେଲ୍ଡ ୱିଲକୋକ୍ସନ୍ ସାଇନ୍ଡ୍ ରାଙ୍କ୍ ପରୀକ୍ଷା, ମିଥ୍ୟା ଆବିଷ୍କାର ହାର ଆଡଜଷ୍ଟଡ୍ p ମୂଲ୍ୟ, FDR <0.05) ଲାଲ (ଫୋଲ୍ଡ ପରିବର୍ତ୍ତନ > 1.2) ଏବଂ ନୀଳ (ଫୋଲ୍ଡ ପରିବର୍ତ୍ତନ < 0.83) ରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି। ) f ସ୍ତରିକ କ୍ଲଷ୍ଟରିଂ ତାପ ମାନଚିତ୍ର ଯାହା LA ଏବଂ BN ମଧ୍ୟରେ ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରାଯାଇଥିବା ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ସ ସଂଖ୍ୟାରେ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପାର୍ଥକ୍ୟ ଦର୍ଶାଉଛି। ଉତ୍ସ ତଥ୍ୟ ଉତ୍ସ ତଥ୍ୟ ଫାଇଲ୍ ଆକାରରେ ପ୍ରଦାନ କରାଯାଇଛି।
ଆବିଷ୍କାର ଗୋଷ୍ଠୀରେ ୧୭୪ HC, ୧୭୦ BN ଏବଂ ୧୩୬ LA ର ମୋଟ ସେରମ୍ ମେଟାବୋଲୋମ୍ UPLC-HRMS ବିଶ୍ଳେଷଣ ବ୍ୟବହାର କରି ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା। ଆମେ ପ୍ରଥମେ ଦେଖାଉଛୁ ଯେ ଗୁଣବତ୍ତା ନିୟନ୍ତ୍ରଣ (QC) ନମୁନାଗୁଡ଼ିକ ଏକ ଅଣନିରୀକ୍ଷଣିତ ପ୍ରମୁଖ ଉପାଦାନ ବିଶ୍ଳେଷଣ (PCA) ମଡେଲର କେନ୍ଦ୍ରରେ ଦୃଢ଼ ଭାବରେ କ୍ଲଷ୍ଟର ହୋଇଛି, ଯାହା ବର୍ତ୍ତମାନର ଅଧ୍ୟୟନର କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତାର ସ୍ଥିରତାକୁ ନିଶ୍ଚିତ କରେ (ପରିପୂରକ ଚିତ୍ର ୨)।
ଚିତ୍ର 1 b ରେ ଆଂଶିକ ସର୍ବନିମ୍ନ ବର୍ଗ-ବିଭେଦକ ବିଶ୍ଳେଷଣ (PLS-DA) ରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା ପରି, ଆମେ ପାଇଲୁ ଯେ LA ଏବଂ BN, LA ଏବଂ HC ମଧ୍ୟରେ ସ୍ପଷ୍ଟ ପାର୍ଥକ୍ୟ ଥିଲା ଯାହା ଧନାତ୍ମକ (+ESI) ଏବଂ ଋଣାତ୍ମକ (−ESI) ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋସ୍ପ୍ରେ ଆୟନାଇଜେସନ୍ ମୋଡରେ ଥିଲା। ପୃଥକ। ତଥାପି, +ESI ଏବଂ -ESI ଅବସ୍ଥାରେ BN ଏବଂ HC ମଧ୍ୟରେ କୌଣସି ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପାର୍ଥକ୍ୟ ମିଳିଲା ନାହିଁ।
ଆମେ LA ଏବଂ HC ମଧ୍ୟରେ 382 ଟି ଭିନ୍ନ ବୈଶିଷ୍ଟ୍ୟ, LA ଏବଂ BN ମଧ୍ୟରେ 231 ଟି ଭିନ୍ନ ବୈଶିଷ୍ଟ୍ୟ ଏବଂ BN ଏବଂ HC (Wilcoxon signed rank test, FDR <0.05 ଏବଂ multiple change >1.2 କିମ୍ବା <0.83) (ଚିତ୍ର .1c-e) ମଧ୍ୟରେ 95 ଟି ଭିନ୍ନ ବୈଶିଷ୍ଟ୍ୟ ପାଇଲୁ। । m/z ମୂଲ୍ୟ, ପ୍ରତିଧାରଣ ସମୟ ଏବଂ ବିଖଣ୍ଡନ ମାସ୍ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରମ୍ ସନ୍ଧାନ (ପଦ୍ଧତି ବିଭାଗରେ ବର୍ଣ୍ଣିତ ବିବରଣୀ) 22 ଦ୍ୱାରା ଏକ ଡାଟାବେସ୍ (mzCloud/HMDB/Chemspider ଲାଇବ୍ରେରୀ) ବିରୁଦ୍ଧରେ ଶିଖରଗୁଡ଼ିକୁ ଆହୁରି ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରାଯାଇଥିଲା (ପରିପୂରକ ତଥ୍ୟ 3)। ଶେଷରେ, LA ବନାମ BN (ଚିତ୍ର 1f ଏବଂ ପରିପୂରକ ସାରଣୀ 2) ଏବଂ LA ବନାମ HC (ପରିପୂରକ ଚିତ୍ର 3 ଏବଂ ପରିପୂରକ ସାରଣୀ 2) ପାଇଁ ଯଥାକ୍ରମେ ପ୍ରଚୁରତାରେ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପାର୍ଥକ୍ୟ ସହିତ 33 ଏବଂ 38 ଟି ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରାଯାଇଥିବା ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ଚିହ୍ନଟ କରାଯାଇଥିଲା। ବିପରୀତରେ, PLS-DA ରେ BN ଏବଂ HC ମଧ୍ୟରେ ଓଭରଲାପ୍ ସହିତ ସୁସଙ୍ଗତ, BN ଏବଂ HC (ପରିପୂରକ ସାରଣୀ 2) ରେ ପ୍ରଚୁରତାରେ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପାର୍ଥକ୍ୟ ସହିତ କେବଳ 3 ଟି ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ଚିହ୍ନଟ କରାଯାଇଥିଲା। ଏହି ଭିନ୍ନ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍‌ଗୁଡ଼ିକ ବିଭିନ୍ନ ପ୍ରକାରର ଜୈବ ରାସାୟନିକ ପଦାର୍ଥ (ପରିପୂରକ ଚିତ୍ର 4)କୁ ଆବୃତ କରନ୍ତି। ଏକତ୍ରିତ ଭାବରେ, ଏହି ଫଳାଫଳଗୁଡ଼ିକ ସେରମ୍ ମେଟାବୋଲୋମ୍‌ରେ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପରିବର୍ତ୍ତନ ପ୍ରଦର୍ଶନ କରେ ଯାହା ସୌମ୍ୟ ଫୁସଫୁସ ନୋଡୁଲ୍ସ କିମ୍ବା ସୁସ୍ଥ ବିଷୟ ତୁଳନାରେ ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ଫୁସଫୁସ କର୍କଟ ରୋଗର ମାଲିଗ୍ନାଣ୍ଟ ରୂପାନ୍ତରଣକୁ ପ୍ରତିଫଳିତ କରେ। ଏହି ସମୟରେ, BN ଏବଂ HC ର ସେରମ୍ ମେଟାବୋଲୋମ୍‌ର ସମାନତା ସୂଚାଇ ଦିଏ ଯେ ସୌମ୍ୟ ଫୁସଫୁସ ନୋଡୁଲ୍ସ ସୁସ୍ଥ ବ୍ୟକ୍ତିମାନଙ୍କ ସହିତ ଅନେକ ଜୈବିକ ବୈଶିଷ୍ଟ୍ୟ ଅଂଶୀଦାର କରିପାରେ। ଏପିଡର୍ମାଲ ଗ୍ରୋଥ୍ ଫ୍ୟାକ୍ଟର ରିସେପ୍ଟର (EGFR) ଜିନ୍ ମ୍ୟୁଟେସନ୍ ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମା ସବଟାଇପ୍ 23 ରେ ସାଧାରଣ ହୋଇଥିବାରୁ, ଆମେ ସେରମ୍ ମେଟାବୋଲୋମ୍‌ ଉପରେ ଡ୍ରାଇଭର୍ ମ୍ୟୁଟେସନ୍‌ର ପ୍ରଭାବ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରିବାକୁ ଚେଷ୍ଟା କଲୁ। ତା'ପରେ ଆମେ ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମା ଗୋଷ୍ଠୀରେ EGFR ସ୍ଥିତି ସହିତ 72 ଟି ମାମଲାର ସାମଗ୍ରିକ ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ ପ୍ରୋଫାଇଲ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ କଲୁ। ଆକର୍ଷଣୀୟ ଭାବରେ, ଆମେ PCA ବିଶ୍ଳେଷଣରେ EGFR ମ୍ୟୁଟେଣ୍ଟ ରୋଗୀ (n = 41) ଏବଂ EGFR ୱାଇଲ୍ଡ-ଟାଇପ୍ ରୋଗୀ (n = 31) ମଧ୍ୟରେ ତୁଳନାତ୍ମକ ପ୍ରୋଫାଇଲ୍ ପାଇଲୁ (ପରିପୂରକ ଚିତ୍ର 5a)। ତଥାପି, ଆମେ 7ଟି ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ଚିହ୍ନଟ କରିଥିଲୁ ଯାହାର ପ୍ରଚୁରତା EGFR ମ୍ୟୁଟେସନ୍ ଥିବା ରୋଗୀଙ୍କ ମଧ୍ୟରେ ୱାଇଲ୍ଡ-ଟାଇପ୍ EGFR (t test, p < 0.05 ଏବଂ fold change > 1.2 କିମ୍ବା < 0.83) ଥିବା ରୋଗୀଙ୍କ ତୁଳନାରେ ଉଲ୍ଲେଖନୀୟ ଭାବରେ ପରିବର୍ତ୍ତନ ହୋଇଥିଲା (ପରିପୂରକ ଚିତ୍ର 5b)। ଏହି ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ଗୁଡିକର ଅଧିକାଂଶ (7 ରୁ 5) ହେଉଛି ଆସାଇଲକାର୍ନାଇଟାଇନ୍, ଯାହା ଫ୍ୟାଟି ଏସିଡ୍ ଅକ୍ସିଡେସନ୍ ପଥଗୁଡ଼ିକରେ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଭୂମିକା ଗ୍ରହଣ କରେ।
ଚିତ୍ର 2 a ରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା କାର୍ଯ୍ୟପ୍ରଣାଳୀରେ ଦର୍ଶାଯାଇଥିବା ପରି, ନୋଡ୍ୟୁଲ୍ ବର୍ଗୀକରଣ ପାଇଁ ବାୟୋମାର୍କରଗୁଡ଼ିକୁ LA (n = 136) ଏବଂ BN (n = 170) ରେ ଚିହ୍ନଟ ହୋଇଥିବା 33 ଟି ଭିନ୍ନ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ଉପରେ ଆଧାରିତ ସର୍ବନିମ୍ନ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ସଂକୋଚନ ଅପରେଟର ଏବଂ ଚୟନ ବ୍ୟବହାର କରି ପ୍ରାପ୍ତ କରାଯାଇଥିଲା। ଚଳକଗୁଡ଼ିକର ସର୍ବୋତ୍ତମ ମିଶ୍ରଣ (LASSO) - ବାଇନାରୀ ଲଜିଷ୍ଟିକ୍ ରିଗ୍ରେସନ୍ ମଡେଲ୍। ମଡେଲର ନିର୍ଭରଯୋଗ୍ୟତା ପରୀକ୍ଷା କରିବା ପାଇଁ ଦଶ-ଗୁଣ କ୍ରସ୍-ବ୍ୟାଲିଡେସନ୍ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା। ଚଳକ ଚୟନ ଏବଂ ପାରାମିଟର ନିୟମିତକରଣ ପାରାମିଟର୍ λ24 ସହିତ ଏକ ସମ୍ଭାବନା ସର୍ବାଧିକ ଦଣ୍ଡ ଦ୍ୱାରା ନିୟନ୍ତ୍ରିତ ହୋଇଥାଏ। ବିଭେଦକ ମଡେଲର ବର୍ଗୀକରଣ କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତା ପରୀକ୍ଷା କରିବା ପାଇଁ ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ବୈଧତା (n = 104) ଏବଂ ବାହ୍ୟ ବୈଧତା (n = 111) ଗୋଷ୍ଠୀରେ ବିଶ୍ୱ ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ସ ବିଶ୍ଳେଷଣ ଆହୁରି ସ୍ୱାଧୀନ ଭାବରେ କରାଯାଇଥିଲା। ଫଳସ୍ୱରୂପ, ଆବିଷ୍କାର ସେଟରେ 27 ଟି ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ସର୍ବବୃହତ ହାରାହାରି AUC ମୂଲ୍ୟ (ଚିତ୍ର 2b) ସହିତ ସର୍ବୋତ୍ତମ ବିଭେଦକ ମଡେଲ୍ ଭାବରେ ଚିହ୍ନଟ କରାଯାଇଥିଲା, ଯାହା ମଧ୍ୟରୁ 9 ଟି କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ବୃଦ୍ଧି କରିଥିଲା ​​ଏବଂ BN (ଚିତ୍ର 2c) ତୁଳନାରେ LA ରେ 18 ଟି କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ହ୍ରାସ କରିଥିଲା।
ଦଶ ଗୁଣ କ୍ରସ୍-ବ୍ୟାଲିଡେସନ୍ ମାଧ୍ୟମରେ ଏକ ବାଇନାରୀ ଲଜିଷ୍ଟିକ୍ ରିଗ୍ରେସନ୍ ମଡେଲ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ଡିସ୍କଭରୀ ସେଟ୍‌ରେ ସେରମ୍ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ସର ସର୍ବୋତ୍ତମ ପ୍ୟାନେଲ୍ ଚୟନ କରିବା ଏବଂ ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ଏବଂ ବାହ୍ୟ ବୈଧତା ସେଟ୍‌ରେ ପୂର୍ବାନୁମାନିକ କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତାର ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରିବା ସମେତ ଏକ ପଲ୍‌ମୋନାରୀ ନୋଡ୍ୟୁଲ୍ କ୍ଲାସିଫାୟର୍ ନିର୍ମାଣ ପାଇଁ କାର୍ଯ୍ୟପ୍ରବାହ। b ମେଟାବୋଲିକ୍ ବାୟୋମାର୍କର୍ ଚୟନ ପାଇଁ LASSO ରିଗ୍ରେସନ୍ ମଡେଲ୍‌ର କ୍ରସ୍-ବ୍ୟାଲିଡେସନ୍ ପରିସଂଖ୍ୟାନ। ଉପରେ ଦିଆଯାଇଥିବା ସଂଖ୍ୟାଗୁଡ଼ିକ ଏକ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ λ ରେ ଚୟନ କରାଯାଇଥିବା ବାୟୋମାର୍କର୍‌ର ହାରାହାରି ସଂଖ୍ୟାକୁ ପ୍ରତିନିଧିତ୍ୱ କରେ। ଲାଲ ବିନ୍ଦୁଯୁକ୍ତ ରେଖା ସମ୍ପୃକ୍ତ ଲାମ୍ବଡାରେ ହାରାହାରି AUC ମୂଲ୍ୟକୁ ପ୍ରତିନିଧିତ୍ୱ କରେ। ଧୂସର ତ୍ରୁଟି ବାର୍ ସର୍ବନିମ୍ନ ଏବଂ ସର୍ବାଧିକ AUC ମୂଲ୍ୟକୁ ପ୍ରତିନିଧିତ୍ୱ କରେ। ବିନ୍ଦୁଯୁକ୍ତ ରେଖା 27 ଚୟନିତ ବାୟୋମାର୍କର୍‌ ସହିତ ସର୍ବୋତ୍ତମ ମଡେଲ୍‌କୁ ସୂଚିତ କରେ। AUC, ରିସିଭର୍ ଅପରେଟିଂ ବୈଶିଷ୍ଟ୍ୟ (ROC) ବକ୍ର ଅଧୀନରେ କ୍ଷେତ୍ର। c ଡିସ୍କଭରୀ ଗୋଷ୍ଠୀରେ BN ଗୋଷ୍ଠୀ ସହିତ ତୁଳନା କରାଯାଇଥିବା LA ଗୋଷ୍ଠୀରେ 27 ଚୟନିତ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍‌ର ଫୋଲ୍ଡ ପରିବର୍ତ୍ତନ। ଲାଲ ସ୍ତମ୍ଭ - ସକ୍ରିୟକରଣ। ନୀଳ ସ୍ତମ୍ଭ ଏକ ହ୍ରାସ। d–f ରିସିଭର୍ ଅପରେଟିଂ ବୈଶିଷ୍ଟ୍ୟ (ROC) ବକ୍ର ଆବିଷ୍କାର, ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ଏବଂ ବାହ୍ୟ ବୈଶିଷ୍ଟ୍ୟ ସେଟ୍‌ରେ 27 ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ମିଶ୍ରଣ ଉପରେ ଆଧାରିତ ବିଭେଦକ ମଡେଲ୍‌ର ଶକ୍ତି ଦର୍ଶାଉଛି। ଉତ୍ସ ତଥ୍ୟ ଉତ୍ସ ତଥ୍ୟ ଫାଇଲ୍ ଆକାରରେ ପ୍ରଦାନ କରାଯାଇଛି।
ଏହି 27 ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ସ (ପରିପୂରକ ସାରଣୀ 3) ର ଓଜନଯୁକ୍ତ ପ୍ରତିଗମନ ଗୁଣାଙ୍କ ଉପରେ ଆଧାରିତ ଏକ ପୂର୍ବାନୁମାନ ମଡେଲ୍ ସୃଷ୍ଟି କରାଯାଇଥିଲା। ଏହି 27 ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ସ ଉପରେ ଆଧାରିତ ROC ବିଶ୍ଳେଷଣ 0.933 ର ବକ୍ର (AUC) ମୂଲ୍ୟ ଅଧୀନରେ ଏକ କ୍ଷେତ୍ର ପ୍ରଦାନ କରିଥିଲା, ଆବିଷ୍କାର ଗୋଷ୍ଠୀ ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା 0.868 ଥିଲା, ଏବଂ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା 0.859 ଥିଲା (ଚିତ୍ର 2d)। ଏହି ସମୟରେ, LA ଏବଂ HC ମଧ୍ୟରେ 38 ଟି ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରାଯାଇଥିବା ଡିଫରେନ୍ସିଆଲ୍ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ସ ମଧ୍ୟରୁ, 16 ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ସର ଏକ ସେଟ୍ 0.902 ର AUC ହାସଲ କରିଥିଲା ​​ଯାହାର ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା 0.801 ଏବଂ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା 0.856 ଥିଲା HC ରୁ LA କୁ ପାର୍ଥକ୍ୟ କରିବାରେ (ପରିପୂରକ ଚିତ୍ର 6a-c)। ଡିଫରେନ୍ସିଆଲ୍ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ସ ପାଇଁ ବିଭିନ୍ନ ଫୋଲ୍ଡ ପରିବର୍ତ୍ତନ ଥ୍ରେସହୋଲ୍ଡ ଉପରେ ଆଧାରିତ AUC ମୂଲ୍ୟ ମଧ୍ୟ ତୁଳନା କରାଯାଇଥିଲା। ଆମେ ଦେଖିଲୁ ଯେ ବର୍ଗୀକରଣ ମଡେଲ୍ LA ଏବଂ BN (HC) ମଧ୍ୟରେ ପାର୍ଥକ୍ୟ କରିବାରେ ସର୍ବୋତ୍ତମ ପ୍ରଦର୍ଶନ କରିଥିଲା ​​ଯେତେବେଳେ ଫୋଲ୍ଡ ପରିବର୍ତ୍ତନ ସ୍ତର 1.2 ବନାମ 1.5 କିମ୍ବା 2.0 ରେ ସେଟ୍ କରାଯାଇଥିଲା (ପରିପୂରକ ଚିତ୍ର 7a,b)। ୨୭ଟି ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ଗୋଷ୍ଠୀ ଉପରେ ଆଧାରିତ ବର୍ଗୀକରଣ ମଡେଲ୍, ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ଏବଂ ବାହ୍ୟ ଗୋଷ୍ଠୀରେ ଆହୁରି ବୈଧ କରାଯାଇଥିଲା। ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ବୈଧତା ପାଇଁ AUC 0.915 (ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା 0.867, ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା 0.811) ଏବଂ ବାହ୍ୟ ବୈଧତା ପାଇଁ 0.945 (ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା 0.810, ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା 0.979) ଥିଲା (ଚିତ୍ର 2e, f)। ଆନ୍ତଃପ୍ରବେଶକାରୀ ଦକ୍ଷତା ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରିବା ପାଇଁ, ପଦ୍ଧତି ବିଭାଗରେ ବର୍ଣ୍ଣିତ ବାହ୍ୟ ଗୋଷ୍ଠୀରୁ 40 ଟି ନମୁନାକୁ ଏକ ବାହ୍ୟ ପରୀକ୍ଷାଗାରରେ ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା। ବର୍ଗୀକରଣ ସଠିକତା 0.925 (ପରିପୂରକ ଚିତ୍ର 8) ର AUC ହାସଲ କରିଥିଲା। କାରଣ ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମା (LUAD) ପରେ ଫୁସଫୁସ ସ୍କ୍ୱାମସ୍ ସେଲ୍ କାର୍ସିନୋମା (LUSC) ହେଉଛି ଅଣ-କ୍ଷୁଦ୍ର କୋଷ ଫୁସଫୁସ କର୍କଟ (NSCLC) ର ଦ୍ୱିତୀୟ ସବୁଠାରୁ ସାଧାରଣ ଉପପ୍ରକାର, ଆମେ ମେଟାବୋଲିକ୍ ପ୍ରୋଫାଇଲର ବୈଧ ସମ୍ଭାବ୍ୟ ଉପଯୋଗିତା ମଧ୍ୟ ପରୀକ୍ଷା କରିଥିଲୁ। BN ଏବଂ LUSC ର 16 ଟି ମାମଲା। LUSC ଏବଂ BN ମଧ୍ୟରେ ପାର୍ଥକ୍ୟ AUC ଥିଲା 0.776 (ପରିପୂରକ ଚିତ୍ର 9), ଯାହା LUAD ଏବଂ BN ମଧ୍ୟରେ ପାର୍ଥକ୍ୟ ତୁଳନାରେ ଦୁର୍ବଳ କ୍ଷମତାକୁ ସୂଚିତ କରେ।
ଅଧ୍ୟୟନରୁ ଜଣାପଡିଛି ଯେ CT ପ୍ରତିଛବିରେ ନୋଡୁଲର ଆକାର ମାଲିଗ୍ନାନ୍ସିର ସମ୍ଭାବନା ସହିତ ସକାରାତ୍ମକ ଭାବରେ ସହଭାଗୀ ଏବଂ ନୋଡୁଲ ଚିକିତ୍ସାର ଏକ ପ୍ରମୁଖ ନିର୍ଣ୍ଣାୟକ ରହିଛି25,26,27। NELSON ସ୍କ୍ରିନିଂ ଅଧ୍ୟୟନର ବଡ଼ ଗୋଷ୍ଠୀରୁ ତଥ୍ୟ ବିଶ୍ଳେଷଣରୁ ଜଣାପଡିଛି ଯେ ନୋଡ <5 mm ଥିବା ବିଷୟମାନଙ୍କରେ ମାଲିଗ୍ନାନ୍ସିର ବିପଦ ନୋଡ 28 ବିନା ବିଷୟମାନଙ୍କ ସହିତ ସମାନ ଥିଲା। ତେଣୁ, ନିୟମିତ CT ମନିଟରିଂ ଆବଶ୍ୟକ କରୁଥିବା ସର୍ବନିମ୍ନ ଆକାର ହେଉଛି 5 mm, ଯେପରିକି ବ୍ରିଟିଶ ଥୋରାସିକ୍ ସୋସାଇଟି (BTS) ଦ୍ୱାରା ସୁପାରିଶ କରାଯାଇଛି, ଏବଂ ଫ୍ଲିସଚନର ସୋସାଇଟି 29 ଦ୍ୱାରା ସୁପାରିଶ କରାଯାଇଛି 6 mm। ତଥାପି, 6 mm ରୁ ବଡ଼ ଏବଂ ସ୍ପଷ୍ଟ ସୌମ୍ୟ ବୈଶିଷ୍ଟ୍ୟ ବିନା ନୋଡୁଲ, ଯାହାକୁ ଅନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପଲ୍ମୋନାରୀ ନୋଡୁଲ (IPN) କୁହାଯାଏ, କ୍ଲିନିକାଲ୍ ଅଭ୍ୟାସରେ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ ଏବଂ ପରିଚାଳନାରେ ଏକ ପ୍ରମୁଖ ଚ୍ୟାଲେଞ୍ଜ ରହିଛି30,31। ଆମେ ପରବର୍ତ୍ତୀ ସମୟରେ ପରୀକ୍ଷା କରିଥିଲୁ ଯେ ଆବିଷ୍କାର ଏବଂ ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ବୈଧତା ସମୂହରୁ ପୁଲ୍ ହୋଇଥିବା ନମୁନା ବ୍ୟବହାର କରି ନୋଡୁଲ ଆକାର ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ ସ୍ୱାକ୍ଷରକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରିଛି କି ନାହିଁ। 27 ବୈଧତାପ୍ରାପ୍ତ ବାୟୋମାର୍କର ଉପରେ ଧ୍ୟାନ ଦେଇ, ଆମେ ପ୍ରଥମେ HC ଏବଂ BN ସବ୍-6 mm ମେଟାବୋଲୋମର PCA ପ୍ରୋଫାଇଲଗୁଡ଼ିକୁ ତୁଳନା କରିଥିଲୁ। ଆମେ ଦେଖିଲୁ ଯେ HC ଏବଂ BN ପାଇଁ ଅଧିକାଂଶ ଡାଟା ପଏଣ୍ଟ ଓଭରଲାପ୍ ହୋଇଛି, ଯାହା ଦର୍ଶାଉଛି ଯେ ଉଭୟ ଗୋଷ୍ଠୀରେ ସେରମ୍ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ସ୍ତର ସମାନ ଥିଲା (ଚିତ୍ର 3a)। BN ଏବଂ LA (ଚିତ୍ର 3b, c) ରେ ବିଭିନ୍ନ ଆକାର ପରିସର ମଧ୍ୟରେ ବୈଶିଷ୍ଟ୍ୟ ମାନଚିତ୍ର ସଂରକ୍ଷିତ ରହିଥିଲା, ଯେତେବେଳେ 6-20 mm ପରିସର (ଚିତ୍ର 3d) ରେ ମାଲିଗ୍ନାଣ୍ଟ ଏବଂ ସୌମ୍ୟ ନୋଡୁଲ୍ସ ମଧ୍ୟରେ ଏକ ପୃଥକୀକରଣ ପରିଲକ୍ଷିତ ହୋଇଥିଲା। ଏହି ସମୂହର AUC 0.927, ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା 0.868 ଏବଂ ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା 0.820 ଥିଲା ଯାହା 6 ରୁ 20 mm ପରିମାପ ନୋଡୁଲ୍ସର ମାଲିଗ୍ନାନ୍ସିର ପୂର୍ବାନୁମାନ କରିଥାଏ (ଚିତ୍ର 3e, f)। ଆମର ଫଳାଫଳ ଦର୍ଶାଏ ଯେ ଶ୍ରେଣୀବିଭାଗକାରୀ ନୋଡୁଲ୍ ଆକାର ନିର୍ବିଶେଷରେ, ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ମାଲିଗ୍ନାଣ୍ଟ ରୂପାନ୍ତରଣ ଦ୍ୱାରା ହୋଇଥିବା ମେଟାବୋଲିକ୍ ପରିବର୍ତ୍ତନଗୁଡ଼ିକୁ କ୍ୟାପଚର୍ କରିପାରିବ।
ad 27 ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ସର ଏକ ମେଟାବୋଲିକ୍ ବର୍ଗୀକରଣ ଉପରେ ଆଧାରିତ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଗୋଷ୍ଠୀ ମଧ୍ୟରେ PCA ପ୍ରୋଫାଇଲଗୁଡ଼ିକର ତୁଳନା। CC ଏବଂ BN < 6 mm। b BN < 6 mm vs BN 6–20 mm। LA 6–20 mm vs LA 20–30 mm। g BN 6–20 mm ଏବଂ LA 6–20 mm। GC, n = 174; BN < 6 mm, n = 153; BN 6–20 mm, n = 91; LA 6–20 mm, n = 89; LA 20–30 mm, n = 77। e ରିସିଭର ଅପରେଟିଂ ବୈଶିଷ୍ଟ୍ୟ (ROC) ବକ୍ର 6–20 mm ପାଇଁ ଭେଦଭାବକ ମଡେଲ୍ କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତା ଦର୍ଶାଉଛି। f ସମ୍ଭାବ୍ୟତା ମୂଲ୍ୟ 6–20 mm ମାପ ନୋଡୁଲ୍ ପାଇଁ ଲଜିଷ୍ଟିକ୍ ରିଗ୍ରେସନ୍ ମଡେଲ୍ ଉପରେ ଆଧାର କରି ଗଣନା କରାଯାଇଥିଲା। ଧୂସର ବିନ୍ଦୁଯୁକ୍ତ ରେଖା ସର୍ବୋତ୍ତମ କଟଅଫ୍ ମୂଲ୍ୟ (0.455) ପ୍ରତିନିଧିତ୍ୱ କରେ। ଉପରୋକ୍ତ ସଂଖ୍ୟାଗୁଡ଼ିକ ଲସ୍ ଆଞ୍ଜେଲସ୍ ପାଇଁ ପ୍ରକ୍ଷେପିତ ମାମଲାଗୁଡ଼ିକର ପ୍ରତିଶତକୁ ପ୍ରତିନିଧିତ୍ୱ କରେ। ଦୁଇ-ଲାଞ୍ଜ ବିଶିଷ୍ଟ ଛାତ୍ରଙ୍କ ଟି ପରୀକ୍ଷା ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ। PCA, ମୁଖ୍ୟ ଉପାଦାନ ବିଶ୍ଳେଷଣ। ବକ୍ର ତଳେ AUC କ୍ଷେତ୍ର। ଉତ୍ସ ତଥ୍ୟ ଉତ୍ସ ତଥ୍ୟ ଫାଇଲ୍ ଆକାରରେ ପ୍ରଦାନ କରାଯାଇଛି।
ପ୍ରସ୍ତାବିତ ମାଲିଗ୍ନାନ୍ସି ପୂର୍ବାନୁମାନ ମଡେଲର କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତାକୁ ଦର୍ଶାଇବା ପାଇଁ ସମାନ ପଲ୍‌ମୋନାରି ନୋଡ୍ୟୁଲ୍ ଆକାର (୭-୯ ମିମି) ସହିତ ଚାରୋଟି ନମୁନା (୪୪-୬୧ ବର୍ଷ ବୟସ) ଆହୁରି ଚୟନ କରାଯାଇଥିଲା (ଚିତ୍ର ୪କ, ଖ)। ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ସ୍କ୍ରିନିଂରେ, କେସ୍ ୧ କ୍ୟାଲସିଫିକେସନ୍ ସହିତ ଏକ କଠିନ ନୋଡ୍ୟୁଲ୍ ଭାବରେ ଉପସ୍ଥାପିତ ହୋଇଥିଲା, ଯାହା ସୌମ୍ୟତା ସହିତ ଜଡିତ ଏକ ବୈଶିଷ୍ଟ୍ୟ, ଯେତେବେଳେ କେସ୍ ୨ କୌଣସି ସ୍ପଷ୍ଟ ସୌମ୍ୟ ବୈଶିଷ୍ଟ୍ୟ ବିନା ଏକ ଅନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଆଂଶିକ କଠିନ ନୋଡ୍ୟୁଲ୍ ଭାବରେ ଉପସ୍ଥାପିତ ହୋଇଥିଲା। ତିନି ପର୍ଯ୍ୟାୟ ଫଲୋ-ଅପ୍ ସିଟି ସ୍କାନ୍ ଦେଖାଇଥିଲା ଯେ ଏହି ମାମଲାଗୁଡ଼ିକ ୪ ବର୍ଷ ଅବଧି ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ସ୍ଥିର ରହିଥିଲା ​​ଏବଂ ତେଣୁ ସେମାନଙ୍କୁ ସୌମ୍ୟ ନୋଡ୍ୟୁଲ୍ ଭାବରେ ବିବେଚନା କରାଯାଇଥିଲା (ଚିତ୍ର ୪କ)। ସିରିଏଲ୍ ସିଟି ସ୍କାନ୍ ର କ୍ଲିନିକାଲ୍ ମୂଲ୍ୟାୟନ ସହିତ ତୁଳନା କରାଯାଇ, ବର୍ତ୍ତମାନର ବର୍ଗୀକୃତ ମଡେଲ୍ ସହିତ ଏକକ-ସଟ୍ ସେରମ୍ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ ସମ୍ଭାବ୍ୟ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଉପରେ ଆଧାରିତ ଏହି ସୌମ୍ୟ ନୋଡ୍ୟୁଲ୍ଗୁଡ଼ିକୁ ଶୀଘ୍ର ଏବଂ ସଠିକ୍ ଭାବରେ ଚିହ୍ନଟ କରିଥିଲା ​​(ସାରଣୀ ୧)। କେସ୍ ୩ ରେ ଚିତ୍ର ୪ଖ ପ୍ଲୁରାଲ୍ ପ୍ରତ୍ୟାହାରର ଚିହ୍ନ ସହିତ ଏକ ନୋଡ୍ୟୁଲ୍ ଦେଖାଏ, ଯାହା ପ୍ରାୟତଃ ମାଲିଗ୍ନାନ୍ସି ସହିତ ଜଡିତ 32। କେସ୍ ୪ ଏକ ଅନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଆଂଶିକ କଠିନ ନୋଡ୍ୟୁଲ୍ ଭାବରେ ଉପସ୍ଥାପିତ ହୋଇଥିଲା ଯାହାର କୌଣସି ସୌମ୍ୟ କାରଣର ପ୍ରମାଣ ନାହିଁ। ବର୍ଗୀକରଣ ମଡେଲ (ସାରଣୀ 1) ଅନୁସାରେ ଏହି ସମସ୍ତ ମାମଲାକୁ ମାଲିଗ୍ନାଣ୍ଟ ଭାବରେ ପୂର୍ବାନୁମାନ କରାଯାଇଥିଲା। ଫୁସଫୁସ ରିସେକ୍ସନ ଅସ୍ତ୍ରୋପଚାର ପରେ ହିଷ୍ଟୋପାଥୋଲୋଜିକାଲ୍ ପରୀକ୍ଷା ଦ୍ୱାରା ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମାର ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ ପ୍ରଦର୍ଶନ କରାଯାଇଥିଲା (ଚିତ୍ର 4b)। ବାହ୍ୟ ବୈଧତା ସେଟ୍ ପାଇଁ, ମେଟାବୋଲିକ୍ ବର୍ଗୀକରଣ 6 ମିମି (ପରିପୂରକ ଚିତ୍ର 10) ଠାରୁ ବଡ଼ ଅନିଶ୍ଚିତ ଫୁସଫୁସ ନୋଡୁଲର ଦୁଇଟି ମାମଲାକୁ ସଠିକ୍ ଭାବରେ ପୂର୍ବାନୁମାନ କରିଥିଲା।
ଦୁଇଟି ମଇନ ନୋଡୁଲ୍ସର ଫୁସଫୁସର ଅକ୍ଷୀୟ ଝରକାର CT ଚିତ୍ର। ମାମଲା 1 ରେ, 4 ବର୍ଷ ପରେ CT ସ୍କାନରେ ଡାହାଣ ତଳ ଲୋବରେ କ୍ୟାଲସିଫିକେସନ୍ ସହିତ 7 ମିମି ମାପର ଏକ ସ୍ଥିର କଠିନ ନୋଡୁଲ୍ ଦେଖାଗଲା। ମାମଲା 2 ରେ, 5 ବର୍ଷ ପରେ CT ସ୍କାନରେ ଡାହାଣ ଉପର ଲୋବରେ 7 ମିମି ବ୍ୟାସ ସହିତ ଏକ ସ୍ଥିର, ଆଂଶିକ କଠିନ ନୋଡୁଲ୍ ଦେଖାଗଲା। b ଫୁସଫୁସ ରିସେକ୍ସନ ପୂର୍ବରୁ ଷ୍ଟେଜ୍ I ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମାର ଦୁଇଟି ମାମଲାର ଫୁସଫୁସର ଅକ୍ଷୀୟ ଝରକାର CT ଚିତ୍ର ଏବଂ ଅନୁରୂପ ପାଥୋଲୋଜିକାଲ ଅଧ୍ୟୟନ। ମାମଲା 3 ରେ ଡାହାଣ ଉପର ଲୋବରେ 8 ମିମି ବ୍ୟାସ ସହିତ ଏକ ନୋଡୁଲ୍ ଦେଖାଗଲା ଯାହା ପ୍ଲୁରାଲ୍ ରିଟ୍ରାକ୍ସନ୍ ସହିତ। ମାମଲା 4 ରେ ବାମ ଉପର ଲୋବରେ 9 ମିମି ମାପର ଏକ ଆଂଶିକ କଠିନ ଭୂମି-ଗ୍ଲାସ୍ ନୋଡୁଲ୍ ଦେଖାଗଲା। ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମାର ଆସିନାର ବୃଦ୍ଧି ଢାଞ୍ଚା ପ୍ରଦର୍ଶନ କରୁଥିବା ହେମାଟୋକ୍ସିଲିନ୍ ଏବଂ ଇଓସିନ୍ (H&E) ଷ୍ଟେନ୍ ହେଉଛି। ତୀରଗୁଡ଼ିକ CT ଚିତ୍ରରେ ଚିହ୍ନଟ ହୋଇଥିବା ନୋଡୁଲ୍ଗୁଡ଼ିକୁ ସୂଚିତ କରେ। H&E ଚିତ୍ରଗୁଡ଼ିକ ହେଉଛି ରୋଗ ବିଶେଷଜ୍ଞଙ୍କ ଦ୍ୱାରା ପରୀକ୍ଷିତ ବହୁବିଧ (> 3) ଅଣୁବୀକ୍ଷଣୀୟ କ୍ଷେତ୍ରର ପ୍ରତିନିଧିତ୍ୱ କରୁଥିବା ଚିତ୍ର।
ଏକତ୍ରିତ ଭାବରେ, ଆମର ଫଳାଫଳଗୁଡ଼ିକ ପଲ୍‌ଫୁସନା ନୋଡୁଲ୍ସର ବିଭେଦକ ନିର୍ଣ୍ଣୟରେ ସେରମ୍ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ବାୟୋମାର୍କରର ସମ୍ଭାବ୍ୟ ମୂଲ୍ୟ ପ୍ରଦର୍ଶନ କରେ, ଯାହା CT ସ୍କ୍ରିନିଂ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରିବା ସମୟରେ ଚ୍ୟାଲେଞ୍ଜ ସୃଷ୍ଟି କରିପାରେ।
ଏକ ବୈଧ ଡିଫରେନ୍ସିଆଲ୍ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ପ୍ୟାନେଲ୍ ଉପରେ ଆଧାର କରି, ଆମେ ପ୍ରମୁଖ ମେଟାବୋଲିକ୍ ପରିବର୍ତ୍ତନର ଜୈବିକ ସମ୍ପର୍କ ଚିହ୍ନଟ କରିବାକୁ ଚେଷ୍ଟା କଲୁ। MetaboAnalyst ଦ୍ୱାରା KEGG ପାଥୱେ ସମୃଦ୍ଧି ବିଶ୍ଳେଷଣ ଦୁଇଟି ପ୍ରଦତ୍ତ ଗୋଷ୍ଠୀ ମଧ୍ୟରେ 6ଟି ସାଧାରଣ ଉଲ୍ଲେଖନୀୟ ଭାବରେ ପରିବର୍ତ୍ତିତ ପଥ ଚିହ୍ନଟ କଲା (LA vs. HC ଏବଂ LA vs. BN, ଆଡଜଷ୍ଟ p ≤ 0.001, ପ୍ରଭାବ > 0.01)। ଏହି ପରିବର୍ତ୍ତନଗୁଡ଼ିକ ପାଇରୁଭେଟ୍ ମେଟାବୋଲିଜିମ୍, ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ମେଟାବୋଲିଜିମ୍, ନିଆସିନ୍ ଏବଂ ନିକୋଟିନାମାଇଡ୍ ମେଟାବୋଲିଜିମ୍, ଗ୍ଲାଇକୋଲିସିସ୍, TCA ଚକ୍ର ଏବଂ ପ୍ୟୁରିନ୍ ମେଟାବୋଲିଜିମ୍ (ଚିତ୍ର 5a) ରେ ବ୍ୟାଘାତ ଦ୍ୱାରା ଚିହ୍ନିତ ହୋଇଥିଲା। ତା'ପରେ ଆମେ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ପରିମାଣୀକରଣ ବ୍ୟବହାର କରି ପ୍ରମୁଖ ପରିବର୍ତ୍ତନଗୁଡ଼ିକୁ ଯାଞ୍ଚ କରିବା ପାଇଁ ଲକ୍ଷ୍ୟଭୁକ୍ତ ମେଟାବୋଲିମିକ୍ସ ପ୍ରଦର୍ଶନ କଲୁ। ପ୍ରାମାଣିକ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ମାନକ ବ୍ୟବହାର କରି ଟ୍ରିପଲ୍ କ୍ୱାଡ୍ରୁପୋଲ୍ ମାସ୍ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରୋମେଟ୍ରି (QQQ) ଦ୍ୱାରା ସାଧାରଣତଃ ପରିବର୍ତ୍ତିତ ପଥଗୁଡ଼ିକରେ ସାଧାରଣ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍‌ଗୁଡ଼ିକର ନିର୍ଣ୍ଣୟ। ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ସ ଅଧ୍ୟୟନ ଲକ୍ଷ୍ୟ ନମୁନାର ଜନସଂଖ୍ୟାଗତ ବୈଶିଷ୍ଟ୍ୟଗୁଡ଼ିକୁ ପରିପୂରକ ସାରଣୀ 4 ରେ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରାଯାଇଛି। ଆମର ବିଶ୍ୱସ୍ତରୀୟ ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ସ ଫଳାଫଳ ସହିତ ସମନ୍ୱିତ, ପରିମାଣାତ୍ମକ ବିଶ୍ଳେଷଣ ନିଶ୍ଚିତ କରିଛି ଯେ BN ଏବଂ HC ତୁଳନାରେ LA ରେ ହାଇପୋକ୍ସାନ୍ଥିନ ଏବଂ ଜାଣ୍ଟାଇନ, ପାଇରୁଭେଟ୍ ଏବଂ ଲାକ୍ଟେଟ୍ ବୃଦ୍ଧି ପାଇଥିଲା (ଚିତ୍ର 5b, c, p <0.05)। ତଥାପି, BN ଏବଂ HC ମଧ୍ୟରେ ଏହି ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ସରେ କୌଣସି ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପାର୍ଥକ୍ୟ ମିଳିଲା ନାହିଁ।
BN ଏବଂ HC ଗୋଷ୍ଠୀ ତୁଳନାରେ LA ଗୋଷ୍ଠୀରେ ଉଲ୍ଲେଖନୀୟ ଭାବରେ ଭିନ୍ନ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ସର KEGG ପଥ ସମୃଦ୍ଧି ବିଶ୍ଳେଷଣ। ଏକ ଦୁଇ-ଲାଞ୍ଜଯୁକ୍ତ ଗ୍ଲୋବାଲଟେଷ୍ଟ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା, ଏବଂ ହୋଲମ୍-ବୋନଫେରୋନି ପଦ୍ଧତି ବ୍ୟବହାର କରି p ମୂଲ୍ୟଗୁଡ଼ିକୁ ଆଡଜଷ୍ଟ କରାଯାଇଥିଲା (p ≤ 0.001 ଏବଂ ପ୍ରଭାବ ଆକାର > 0.01)। b–d LC-MS/MS (ପ୍ରତି ଗୋଷ୍ଠୀ n = 70) ଦ୍ୱାରା ନିର୍ଣ୍ଣିତ ସିରମ୍ HC, BN, ଏବଂ LA ରେ ହାଇପୋକ୍ସାନ୍ଥିନ, ଜାନଥାଇନ, ଲାକ୍ଟେଟ, ପାଇରୁଭେଟ ଏବଂ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ ସ୍ତର ଦେଖାଉଥିବା ଭାୟୋଲିନ୍ ପ୍ଲଟ୍। ଧଳା ଏବଂ କଳା ବିନ୍ଦୁଯୁକ୍ତ ରେଖା ଯଥାକ୍ରମେ ମଧ୍ୟମା ଏବଂ କ୍ୱାର୍ଟାଇଲ୍ ସୂଚିତ କରେ। e ଭାୟୋଲିନ୍ ପ୍ଲଟ୍ LUAD-TCGA ଡାଟାସେଟରେ ସାଧାରଣ ଫୁସଫୁସ ଟିସୁ (n = 59) ତୁଳନାରେ ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମା (n = 513) ରେ SLC7A5 ଏବଂ QPRT ର ସାଧାରଣକୃତ Log2TPM (ପ୍ରତି ମିଲିୟନ ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପ୍ଟ) mRNA ପ୍ରକାଶନ ଦେଖାଉଥିବା। ଧଳା ବାକ୍ସ ଇଣ୍ଟରକ୍ୱାର୍ଟାଇଲ୍ ପରିସରକୁ ପ୍ରତିନିଧିତ୍ୱ କରେ, କେନ୍ଦ୍ରରେ ଥିବା ଭୂସମାନ୍ତର କଳା ରେଖା ମଧ୍ୟମାକୁ ପ୍ରତିନିଧିତ୍ୱ କରେ, ଏବଂ ବାକ୍ସରୁ ବିସ୍ତାରିତ ଭୂଲମ୍ବ କଳା ରେଖା 95% ଆତ୍ମବିଶ୍ୱାସ ବ୍ୟବଧାନ (CI)କୁ ପ୍ରତିନିଧିତ୍ୱ କରେ। f ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମା (n = 513) ଏବଂ ସାଧାରଣ ଫୁସଫୁସ ଟିସୁ (n = 59) ରେ SLC7A5 ଏବଂ GAPDH ପ୍ରକାଶନର ପିଅର୍ସନ ସହସଂଯୋଗ ପ୍ଲଟ୍। ଧୂସର କ୍ଷେତ୍ର 95% CI କୁ ପ୍ରତିନିଧିତ୍ୱ କରେ। r, ପିଅର୍ସନ ସହସଂଯୋଗ ଗୁଣାଙ୍କ। g LC-MS/MS ଦ୍ୱାରା ନିର୍ଣ୍ଣିତ ଅ-ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ shRNA ନିୟନ୍ତ୍ରଣ (NC) ଏବଂ shSLC7A5 (Sh1, Sh2) ସହିତ ସ୍ଥାନାନ୍ତରିତ A549 କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ସାଧାରଣ କୋଷୀୟ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ସ୍ତର। ପ୍ରତ୍ୟେକ ଗୋଷ୍ଠୀରେ ପାଞ୍ଚଟି ଜୈବିକ ସ୍ୱାଧୀନ ନମୁନାର ପରିସଂଖ୍ୟାନ ବିଶ୍ଳେଷଣ ଉପସ୍ଥାପିତ ହୋଇଛି। h A549 କୋଷ (NC) ଏବଂ SLC7A5 ନକଡାଉନ୍ A549 କୋଷ (Sh1, Sh2) ରେ NADt ର କୋଷୀୟ ସ୍ତର (NAD+ ଏବଂ NADH ସମେତ ମୋଟ NAD)। ପ୍ରତ୍ୟେକ ଗୋଷ୍ଠୀରେ ତିନୋଟି ଜୈବିକ ସ୍ୱାଧୀନ ନମୁନାର ପରିସଂଖ୍ୟାନ ବିଶ୍ଳେଷଣ ଉପସ୍ଥାପିତ ହୋଇଛି। i SLC7A5 ନକଡାଉନ ପୂର୍ବରୁ ଏବଂ ପରେ A549 କୋଷଗୁଡ଼ିକର ଗ୍ଲାଇକୋଲାଇଟିକ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ବାହ୍ୟକୋଷୀୟ ଏସିଡିଫିକେସନ୍ ହାର (ECAR) ଦ୍ୱାରା ମାପ କରାଯାଇଥିଲା (n = ପ୍ରତି ଗୋଷ୍ଠୀରେ 4 ଜୈବିକ ଭାବରେ ସ୍ୱାଧୀନ ନମୁନା)। 2-DG,2-ଡିଅକ୍ସି-D-ଗ୍ଲୁକୋଜ୍। ଦୁଇ-ଲାଞ୍ଜ ଛାତ୍ରଙ୍କ t ପରୀକ୍ଷା (b–h) ରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା। (g–i) ରେ, ତ୍ରୁଟି ବାର୍ ମାନଦଣ୍ଡ ± SD ପ୍ରତିନିଧିତ୍ୱ କରେ, ପ୍ରତ୍ୟେକ ପରୀକ୍ଷଣ ତିନିଥର ସ୍ୱାଧୀନ ଭାବରେ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଫଳାଫଳ ସମାନ ଥିଲା। ଉତ୍ସ ତଥ୍ୟ ଉତ୍ସ ତଥ୍ୟ ଫାଇଲ୍ ଆକାରରେ ପ୍ରଦାନ କରାଯାଇଛି।
LA ଗୋଷ୍ଠୀରେ ପରିବର୍ତ୍ତିତ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ମେଟାବୋଲିଜିମର ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପ୍ରଭାବକୁ ବିଚାର କରି, ଆମେ QQQ ବ୍ୟବହାର କରି HC, BN, ଏବଂ LA ଗୋଷ୍ଠୀରେ ସେରମ୍ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ସ୍ତର ମଧ୍ୟ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରିଥିଲୁ। ଆମେ ପାଇଲୁ ଯେ HC କିମ୍ବା BN ତୁଳନାରେ LA ରେ ସେରମ୍ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ହ୍ରାସ ପାଇଥିଲା (p < 0.001, ଚିତ୍ର 5d), ଯାହା ପୂର୍ବ ଫଳାଫଳ ସହିତ ସୁସଙ୍ଗତ ଯେ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଗୋଷ୍ଠୀରୁ ସୁସ୍ଥ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ତୁଳନାରେ ଫୁସଫୁସ କର୍କଟ ରୋଗୀଙ୍କ ମଧ୍ୟରେ ପରିଚଳିତ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ସ୍ତର କମ୍ ଥାଏ 33,34,35। PET/CT ଟ୍ରେସର 11C-ମିଥାଇଲ୍-L-ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ଅନ୍ୟ ଏକ ଅଧ୍ୟୟନରୁ ଜଣାପଡିଛି ଯେ ଫୁସଫୁସ କର୍କଟ ଟିସୁରେ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ସିଗନାଲ ପ୍ରତିଧାରଣ ସମୟ ସୌମ୍ୟ କ୍ଷତ କିମ୍ବା ସାଧାରଣ ଟିସୁ ତୁଳନାରେ ଯଥେଷ୍ଟ ବୃଦ୍ଧି ପାଇଛି36। ଆମେ ଅନୁମାନ କରୁଛୁ ଯେ LA ସେରମ୍ ରେ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ହ୍ରାସ ଫୁସଫୁସ କର୍କଟ କୋଷ ଦ୍ୱାରା ସକ୍ରିୟ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ଗ୍ରହଣକୁ ପ୍ରତିଫଳିତ କରିପାରେ।
ଏହା ମଧ୍ୟ ଜଣାଶୁଣା ଯେ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ କ୍ୟାଟାବୋଲିଜିମ୍‌ର କାଇନୁରେନାଇନ୍ ପାଥ୍‌ର ଶେଷ ଉତ୍ପାଦ ହେଉଛି NAD+37,38, ଯାହା ଗ୍ଲାଇକୋଲାଇସିସ୍‌39 ରେ 1,3-ବିସ୍ଫସଫୋଗ୍ଲାଇସେରେଟ୍ ସହିତ ଗ୍ଲିସେରାଲଡିହାଇଡ୍-3-ଫସଫେଟ୍‌ର ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପାଇଁ ଏକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ସବ୍‌ଷ୍ଟ୍ରେଟ୍। ପୂର୍ବ ଅଧ୍ୟୟନଗୁଡ଼ିକ ପ୍ରତିରକ୍ଷା ନିୟନ୍ତ୍ରଣରେ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ କ୍ୟାଟାବୋଲିଜିମ୍‌ର ଭୂମିକା ଉପରେ ଧ୍ୟାନ କେନ୍ଦ୍ରିତ କରିଥିବା ବେଳେ, ଆମେ ବର୍ତ୍ତମାନର ଅଧ୍ୟୟନରେ ପରିଲକ୍ଷିତ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ଡିସ୍ରେଗୁଲେସନ୍‌ ଏବଂ ଗ୍ଲାଇକୋଲାଇଟିକ୍ ପାଥ୍‌ ମଧ୍ୟରେ ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟାକୁ ସ୍ପଷ୍ଟ କରିବାକୁ ଚେଷ୍ଟା କରିଥିଲୁ। ଦ୍ରବଣୀୟ ପରିବହନକାରୀ ପରିବାର 7 ସଦସ୍ୟ 5 (SLC7A5) ଏକ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ଟ୍ରାନ୍ସପୋର୍ଟର ଭାବରେ ଜଣାଶୁଣା 43,44,45। କ୍ୱିନୋଲିନିକ୍ ଏସିଡ୍ ଫସ୍ଫୋରିବୋସିଲ୍‌ଟ୍ରାନ୍ସଫେରେଜ୍‌ (QPRT) ହେଉଛି କାଇନୁରେନାଇନ୍ ପାଥ୍‌ର ନିମ୍ନ ପ୍ରବାହରେ ଅବସ୍ଥିତ ଏକ ଏନଜାଇମ୍ ଯାହା କ୍ୱିନୋଲିନିକ୍ ଏସିଡ୍‌କୁ NAMN46 ରେ ପରିବର୍ତ୍ତନ କରେ। LUAD TCGA ଡାଟାସେଟ୍‌ର ଯାଞ୍ଚରୁ ଜଣାପଡିଛି ଯେ ସାଧାରଣ ଟିସୁ ତୁଳନାରେ ଟ୍ୟୁମର ଟିସୁରେ SLC7A5 ଏବଂ QPRT ଉଭୟ ଉଲ୍ଲେଖନୀୟ ଭାବରେ ଉପନିୟନ୍ତ୍ରିତ ହୋଇଥିଲେ (ଚିତ୍ର 5e)। ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମା (ପରିପୂରକ ଚିତ୍ର 11) ର ପର୍ଯ୍ୟାୟ I ଏବଂ II ଏବଂ ପର୍ଯ୍ୟାୟ III ଏବଂ IV ରେ ଏହି ବୃଦ୍ଧି ପରିଲକ୍ଷିତ ହୋଇଥିଲା, ଯାହା ଟ୍ୟୁମରିଜେନେସିସ୍ ସହିତ ଜଡିତ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ମେଟାବୋଲିଜିମ୍‌ରେ ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ବ୍ୟାଘାତକୁ ସୂଚିତ କରେ।
ଏହା ସହିତ, LUAD-TCGA ଡାଟାସେଟ୍ କର୍କଟ ରୋଗୀ ନମୁନାରେ SLC7A5 ଏବଂ GAPDH mRNA ପ୍ରକାଶନ ମଧ୍ୟରେ ଏକ ସକାରାତ୍ମକ ସମ୍ପର୍କ ଦେଖାଇଛି (r = 0.45, p = 1.55E-26, ଚିତ୍ର 5f)। ବିପରୀତରେ, ସାଧାରଣ ଫୁସଫୁସ ଟିସୁରେ ଏପରି ଜିନ୍ ସ୍ୱାକ୍ଷର ମଧ୍ୟରେ କୌଣସି ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ସମ୍ପର୍କ ମିଳିଲା ନାହିଁ (r = 0.25, p = 0.06, ଚିତ୍ର 5f)। A549 କୋଷରେ SLC7A5 (ପରିପୂରକ ଚିତ୍ର 12) ର ନକଡାଉନ୍ କୋଷିକା ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ଏବଂ NAD(H) ସ୍ତରକୁ ଉଲ୍ଲେଖନୀୟ ଭାବରେ ହ୍ରାସ କରିଛି (ଚିତ୍ର 5g,h), ଯାହାର ଫଳସ୍ୱରୂପ ବାହ୍ୟ କୋଷିକା ଏସିଡିଫିକେସନ୍ ହାର (ECAR) ଦ୍ୱାରା ମାପ କରାଯାଇଥିବା ଗ୍ଲାଇକୋଲାଇଟିକ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ସୃଷ୍ଟି କରିଛି (ଚିତ୍ର 1)। 5i)। ତେଣୁ, ସେରମ୍ ଏବଂ ଇନ୍ ଭିଟ୍ରୋ ଚିହ୍ନଟରେ ମେଟାବୋଲିକ୍ ପରିବର୍ତ୍ତନ ଉପରେ ଆଧାର କରି, ଆମେ ଅନୁମାନ କରୁଛୁ ଯେ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ମେଟାବୋଲିଜିମ୍ କାଇନୁରେନାଇନ୍ ପଥ ମାଧ୍ୟମରେ NAD+ ଉତ୍ପାଦନ କରିପାରେ ଏବଂ ଫୁସଫୁସ କର୍କଟ ରୋଗରେ ଗ୍ଲାଇକୋଲାଇସିସ୍ ପ୍ରୋତ୍ସାହିତ କରିବାରେ ଏକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଭୂମିକା ଗ୍ରହଣ କରିପାରେ।
ଅଧ୍ୟୟନରୁ ଜଣାପଡିଛି ଯେ LDCT ଦ୍ୱାରା ଚିହ୍ନଟ ହୋଇଥିବା ବହୁ ସଂଖ୍ୟକ ଅନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଫୁସଫୁସ ନୋଡୁଲ୍ସ ମାଲିଗ୍ନାନ୍ସିର ମିଥ୍ୟା-ସକାରାତ୍ମକ ନିର୍ଣ୍ଣୟ ଯୋଗୁଁ PET-CT, ଫୁସଫୁସ ବାୟୋପ୍ସି ଏବଂ ଅତ୍ୟଧିକ ଚିକିତ୍ସା ଭଳି ଅତିରିକ୍ତ ପରୀକ୍ଷାର ଆବଶ୍ୟକତା ସୃଷ୍ଟି କରିପାରେ।31 ଚିତ୍ର 6 ରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା ପରି, ଆମର ଅଧ୍ୟୟନ ସମ୍ଭାବ୍ୟ ନିର୍ଣ୍ଣୟ ମୂଲ୍ୟ ସହିତ ସେରମ୍ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ସର ଏକ ପ୍ୟାନେଲ୍ ଚିହ୍ନଟ କରିଛି ଯାହା CT ଦ୍ୱାରା ଚିହ୍ନଟ ହୋଇଥିବା ଫୁସଫୁସ ନୋଡୁଲ୍ସର ବିପଦ ସ୍ତରୀକରଣ ଏବଂ ପରବର୍ତ୍ତୀ ପରିଚାଳନାକୁ ଉନ୍ନତ କରିପାରେ।
ଫୁସଫୁସ ନୋଡୁଲଗୁଡିକ କମ-ଡୋଜ୍ କମ୍ପ୍ୟୁଟେଡ୍ ଟୋମୋଗ୍ରାଫି (LDCT) ବ୍ୟବହାର କରି ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରାଯାଏ ଯାହାର ଇମେଜିଂ ବୈଶିଷ୍ଟ୍ୟଗୁଡ଼ିକ ମୃଦୁ କିମ୍ବା ମାଲିଗ୍ନାଣ୍ଟ କାରଣଗୁଡ଼ିକୁ ସୂଚିତ କରିଥାଏ। ନୋଡୁଲର ଅନିଶ୍ଚିତ ଫଳାଫଳ ବାରମ୍ବାର ଅନୁସରଣ ପରିଦର୍ଶନ, ଅନାବଶ୍ୟକ ହସ୍ତକ୍ଷେପ ଏବଂ ଅତ୍ୟଧିକ ଚିକିତ୍ସା ହୋଇପାରେ। ନିଦାନ ମୂଲ୍ୟ ସହିତ ସେରମ୍ ମେଟାବୋଲିକ୍ ବର୍ଗୀକରଣ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରିବା ଦ୍ୱାରା ଫୁସଫୁସ ନୋଡୁଲର ବିପଦ ମୂଲ୍ୟାୟନ ଏବଂ ପରବର୍ତ୍ତୀ ପରିଚାଳନାରେ ଉନ୍ନତି ଆସିପାରେ। PET ପୋଜିଟ୍ରନ୍ ନିର୍ଗମନ ଟୋମୋଗ୍ରାଫି।
US NLST ଅଧ୍ୟୟନ ଏବଂ ୟୁରୋପୀୟ NELSON ଅଧ୍ୟୟନରୁ ମିଳିଥିବା ତଥ୍ୟ ସୂଚାଇ ଦିଏ ଯେ କମ୍-ଡୋଜ୍ କମ୍ପ୍ୟୁଟେଡ୍ ଟୋମୋଗ୍ରାଫି (LDCT) ସହିତ ଉଚ୍ଚ-ବିପଦଗ୍ରସ୍ତ ଗୋଷ୍ଠୀଗୁଡ଼ିକର ସ୍କ୍ରିନିଂ ଫୁସଫୁସ କର୍କଟ ମୃତ୍ୟୁହାର ହ୍ରାସ କରିପାରିବ1,3। ତଥାପି, LDCT ଦ୍ୱାରା ଚିହ୍ନଟ ହୋଇଥିବା ବହୁ ସଂଖ୍ୟକ ଆକସ୍ମିକ ପଲ୍‌ମୋନାରୀ ନୋଡୁଲ୍ସର ବିପଦ ମୂଲ୍ୟାୟନ ଏବଂ ପରବର୍ତ୍ତୀ କ୍ଲିନିକାଲ୍ ପରିଚାଳନା ସବୁଠାରୁ ଚ୍ୟାଲେଞ୍ଜିଂ ରହିଛି। ମୁଖ୍ୟ ଲକ୍ଷ୍ୟ ହେଉଛି ନିର୍ଭରଯୋଗ୍ୟ ବାୟୋମାର୍କରଗୁଡ଼ିକୁ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରି ବିଦ୍ୟମାନ LDCT-ଆଧାରିତ ପ୍ରୋଟୋକଲର ସଠିକ୍ ବର୍ଗୀକରଣକୁ ଅପ୍ଟିମାଇଜ୍ କରିବା।
ରକ୍ତ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ସ ଭଳି କିଛି ଆଣବିକ ବାୟୋମାର୍କରଗୁଡ଼ିକୁ ସୁସ୍ଥ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ସହିତ ଫୁସଫୁସ କର୍କଟକୁ ତୁଳନା କରି ଚିହ୍ନଟ କରାଯାଇଛି15,17। ବର୍ତ୍ତମାନର ଅଧ୍ୟୟନରେ, ଆମେ LDCT ଦ୍ୱାରା ଆକସ୍ମିକ ଭାବରେ ଚିହ୍ନଟ ହୋଇଥିବା ସୌମ୍ୟ ଏବଂ ମାଲିଗ୍ନାଣ୍ଟ ପଲ୍‌ମୋନାରୀ ନୋଡୁଲ୍ସ ମଧ୍ୟରେ ପାର୍ଥକ୍ୟ କରିବା ପାଇଁ ସେରମ୍ ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ସ ବିଶ୍ଳେଷଣର ପ୍ରୟୋଗ ଉପରେ ଧ୍ୟାନ ଦେଇଛୁ। ଆମେ UPLC-HRMS ବିଶ୍ଳେଷଣ ବ୍ୟବହାର କରି ସୁସ୍ଥ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ (HC), ସୌମ୍ୟ ଫୁସଫୁସ ନୋଡୁଲ୍ସ (BN), ଏବଂ ପର୍ଯ୍ୟାୟ I ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମା (LA) ନମୁନାର ବିଶ୍ୱସ୍ତରୀୟ ସେରମ୍ ମେଟାବୋଲୋମ୍ ତୁଳନା କରିଛୁ। ଆମେ ପାଇଲୁ ଯେ HC ଏବଂ BN ର ସମାନ ମେଟାବୋଲିକ୍ ପ୍ରୋଫାଇଲ୍ ଥିଲା, ଯେତେବେଳେ LA HC ଏବଂ BN ତୁଳନାରେ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପରିବର୍ତ୍ତନ ଦେଖାଇଛି। ଆମେ HC ଏବଂ BN ରୁ LA କୁ ପୃଥକ କରୁଥିବା ଦୁଇଟି ସେଟ୍ ସେରମ୍ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ସ ଚିହ୍ନଟ କରିଛୁ।
ସୌମ୍ୟ ଏବଂ ମାଲିଗ୍ନାଣ୍ଟ ନୋଡୁଲ୍ସ ପାଇଁ ବର୍ତ୍ତମାନର LDCT-ଆଧାରିତ ଚିହ୍ନଟ ଯୋଜନା ମୁଖ୍ୟତଃ ସମୟ ସହିତ ନୋଡୁଲ୍ସର ଆକାର, ଘନତା, ଆକୃତି ଏବଂ ବୃଦ୍ଧି ହାର ଉପରେ ଆଧାରିତ। ପୂର୍ବ ଅଧ୍ୟୟନଗୁଡ଼ିକ ଦର୍ଶାଇଛି ଯେ ନୋଡୁଲ୍ସର ଆକାର ଫୁସଫୁସ କର୍କଟ ସମ୍ଭାବନା ସହିତ ଘନିଷ୍ଠ ଭାବରେ ଜଡିତ। ଉଚ୍ଚ-ବିପଦଗ୍ରସ୍ତ ରୋଗୀଙ୍କ କ୍ଷେତ୍ରରେ ମଧ୍ୟ, ନୋଡୁଲ୍ସରେ ମାଲିଗ୍ନାନ୍ସିର ବିପଦ <1%। 6 ରୁ 20 ମିମି ମାପ ନୋଡୁଲ୍ସ ପାଇଁ ମାଲିଗ୍ନାନ୍ସିର ବିପଦ 8% ରୁ 64%30 ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ହୋଇଥାଏ। ତେଣୁ, ଫ୍ଲିଶନର ସୋସାଇଟି ନିୟମିତ CT ଅନୁସରଣ ପାଇଁ 6 ମିମିର କଟଅଫ୍ ବ୍ୟାସ ସୁପାରିଶ କରେ। 29 ତଥାପି, 6 ମିମି ଠାରୁ ବଡ଼ ଅନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପଲ୍ମୋନାରୀ ନୋଡୁଲ୍ସ (IPN) ର ବିପଦ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ ଏବଂ ପରିଚାଳନା ପର୍ଯ୍ୟାପ୍ତ ଭାବରେ କରାଯାଇ ନାହିଁ 31। ଜନ୍ମଗତ ହୃଦରୋଗର ବର୍ତ୍ତମାନର ପରିଚାଳନା ସାଧାରଣତଃ ବାରମ୍ବାର CT ମନିଟରିଂ ସହିତ ସତର୍କ ଅପେକ୍ଷା ଉପରେ ଆଧାରିତ।
ବୈଧ ମେଟାବୋଲୋମ୍ ଉପରେ ଆଧାର କରି, ଆମେ ପ୍ରଥମ ଥର ପାଇଁ ସୁସ୍ଥ ବ୍ୟକ୍ତି ଏବଂ ସୌମ୍ୟ ନୋଡୁଲ୍ସ <6 mm ମଧ୍ୟରେ ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ ସ୍ୱାକ୍ଷରର ଓଭରଲାପ୍ ପ୍ରଦର୍ଶନ କରିଥିଲୁ। ଜୈବିକ ସମାନତା ପୂର୍ବ CT ଫଳାଫଳ ସହିତ ସୁସଙ୍ଗତ ଯେ ନୋଡୁଲ୍ସ <6 mm ପାଇଁ ମାଲିଗ୍ନାନ୍ସିର ବିପଦ ନୋଡୁଲ୍ସ ବିନା ବିଷୟମାନଙ୍କ ପରି କମ୍।30 ଏହା ଉଲ୍ଲେଖ କରିବା ଉଚିତ ଯେ ଆମର ଫଳାଫଳଗୁଡ଼ିକ ମଧ୍ୟ ପ୍ରଦର୍ଶନ କରେ ଯେ ସୌମ୍ୟ ନୋଡୁଲ୍ସ <6 mm ଏବଂ ≥6 mm ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ ପ୍ରୋଫାଇଲରେ ଉଚ୍ଚ ସମାନତା ରହିଛି, ଯାହା ସୂଚାଇ ଦିଏ ଯେ ସୌମ୍ୟ ଏଟିଓଲୋଜିର କାର୍ଯ୍ୟକ୍ଷମ ପରିଭାଷା ନୋଡୁଲ୍ସ ଆକାର ନିର୍ବିଶେଷରେ ସ୍ଥିର। ତେଣୁ, ଆଧୁନିକ ଡାଇଗ୍ନୋଷ୍ଟିକ୍ ସେରମ୍ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ପ୍ୟାନେଲ୍ ଏକ ନିୟମ-ବାହାରି ପରୀକ୍ଷା ଭାବରେ ଏକ ଏକକ ପରୀକ୍ଷା ପ୍ରଦାନ କରିପାରେ ଯେତେବେଳେ CT ରେ ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ଭାବରେ ନୋଡୁଲ୍ସ ଚିହ୍ନଟ କରାଯାଏ ଏବଂ ସମ୍ଭାବ୍ୟ ଭାବରେ କ୍ରମିକ ନିରୀକ୍ଷଣ ହ୍ରାସ କରେ। ସେହି ସମୟରେ, ମେଟାବୋଲିକ୍ ବାୟୋମାର୍କରଗୁଡ଼ିକର ସମାନ ପ୍ୟାନେଲ୍ ସୌମ୍ୟ ନୋଡୁଲ୍ସରୁ ≥6 mm ଆକାରର ମାଲିଗ୍ନାନ୍ସ ନୋଡୁଲ୍ସକୁ ପୃଥକ କରିଥିଲା ​​ଏବଂ CT ପ୍ରତିଛବିରେ ସମାନ ଆକାର ଏବଂ ଅସ୍ପଷ୍ଟ ଆକାରର IPN ପାଇଁ ସଠିକ୍ ପୂର୍ବାନୁମାନ ପ୍ରଦାନ କରିଥିଲା। 0.927 AUC ସହିତ ନୋଡୁଲ୍ସ ≥6 mm ର ମାଲିଗ୍ନାନ୍ସିର ପୂର୍ବାନୁମାନ କରିବାରେ ଏହି ସେରମ୍ ମେଟାବୋଲିଜିମ୍ ବର୍ଗୀକରଣ ଭଲ ପ୍ରଦର୍ଶନ କରିଥିଲା। ଏକତ୍ରିତ ଭାବରେ, ଆମର ଫଳାଫଳ ସୂଚାଇ ଦିଏ ଯେ ଅନନ୍ୟ ସେରମ୍ ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ ସ୍ଵାକ୍ଷର ବିଶେଷ ଭାବରେ ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ଟ୍ୟୁମର-ପ୍ରେରିତ ମେଟାବୋଲିକ୍ ପରିବର୍ତ୍ତନକୁ ପ୍ରତିଫଳିତ କରିପାରେ ଏବଂ ନୋଡ୍ୟୁଲ୍ ଆକାର ଉପରେ ନିର୍ଭର କରି ବିପଦ ପୂର୍ବାନୁମାନକାରୀ ଭାବରେ ସମ୍ଭାବ୍ୟ ମୂଲ୍ୟ ରଖିପାରେ।
ଉଲ୍ଲେଖନୀୟ ଭାବରେ, ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମା (LUAD) ଏବଂ ସ୍କ୍ୱାମସ୍ ସେଲ୍ କାର୍ସିନୋମା (LUSC) ହେଉଛି ନନ୍-ସ୍ମଲ୍ ସେଲ୍ ଫୁସଫୁସ କର୍କଟ (NSCLC)ର ମୁଖ୍ୟ ପ୍ରକାର। LUSC ତମାଖୁ ବ୍ୟବହାର ସହିତ ଦୃଢ଼ ଭାବରେ ଜଡିତ ଥିବାରୁ47 ଏବଂ LUAD ହେଉଛି CT ସ୍କ୍ରିନିଂ48 ରେ ଚିହ୍ନଟ ହୋଇଥିବା ଆକସ୍ମିକ ଫୁସଫୁସ ନୋଡୁଲ୍ସର ସବୁଠାରୁ ସାଧାରଣ ହିଷ୍ଟୋଲୋଜି, ଆମର ବର୍ଗୀକୃତ ମଡେଲ୍ ବିଶେଷ ଭାବରେ ପର୍ଯ୍ୟାୟ I ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମା ନମୁନା ପାଇଁ ନିର୍ମିତ ହୋଇଥିଲା। ୱାଙ୍ଗ ଏବଂ ସହକର୍ମୀମାନେ LUAD ଉପରେ ମଧ୍ୟ ଧ୍ୟାନ ଦେଇଥିଲେ ଏବଂ ସୁସ୍ଥ ବ୍ୟକ୍ତିମାନଙ୍କଠାରୁ ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ଫୁସଫୁସ କର୍କଟକୁ ପୃଥକ କରିବା ପାଇଁ ଲିପିଡୋମିକ୍ସ ବ୍ୟବହାର କରି ନଅଟି ଲିପିଡ୍ ସ୍ୱାକ୍ଷର ଚିହ୍ନଟ କରିଥିଲେ17। ଆମେ ପର୍ଯ୍ୟାୟ I LUSC ଏବଂ 74 ସୌମ୍ୟ ନୋଡୁଲ୍ସର 16 ଟି କ୍ଷେତ୍ରରେ ବର୍ତ୍ତମାନର ବର୍ଗୀକୃତ ମଡେଲ୍ ପରୀକ୍ଷା କରିଥିଲୁ ଏବଂ କମ୍ LUSC ପୂର୍ବାନୁମାନ ସଠିକତା (AUC 0.776) ଦେଖିଥିଲୁ, ଯାହା ସୂଚାଇ ଦେଉଛି ଯେ LUAD ଏବଂ LUSC ର ନିଜସ୍ୱ ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ ସ୍ୱାକ୍ଷର ଥାଇପାରେ। ପ୍ରକୃତରେ, LUAD ଏବଂ LUSC ଏଟିଓଲୋଜି, ଜୈବିକ ଉତ୍ପତ୍ତି ଏବଂ ଜେନେଟିକ୍ ବିକୃତିରେ ଭିନ୍ନ ଦେଖାଯାଇଛି49। ତେଣୁ, ସ୍କ୍ରିନିଂ କାର୍ଯ୍ୟକ୍ରମରେ ଫୁସଫୁସ କର୍କଟ ରୋଗର ଜନସଂଖ୍ୟା-ଆଧାରିତ ଚିହ୍ନଟ ପାଇଁ ତାଲିମ ମଡେଲରେ ଅନ୍ୟ ପ୍ରକାରର ହିଷ୍ଟୋଲୋଜି ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରାଯିବା ଉଚିତ।
ଏଠାରେ, ଆମେ ସୁସ୍ଥ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଏବଂ ସୌମ୍ୟ ନୋଡୁଲ୍ସ ତୁଳନାରେ ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମାରେ ଛଅଟି ସର୍ବାଧିକ ପରିବର୍ତ୍ତିତ ପଥ ଚିହ୍ନଟ କରିଛୁ। ଜାନଥାଇନ୍ ଏବଂ ହାଇପୋକ୍ସାନ୍ଥାଇନ୍ ହେଉଛି ପ୍ୟୁରିନ୍ ମେଟାବୋଲିକ୍ ପାଥ୍ୱେର ସାଧାରଣ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍। ଆମର ଫଳାଫଳ ସହିତ ସମାନ, ସୁସ୍ଥ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କିମ୍ବା ପ୍ରି-ଇନ୍ଭେସିଭ୍ ପର୍ଯ୍ୟାୟରେ ଥିବା ରୋଗୀଙ୍କ ତୁଳନାରେ ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମା ରୋଗୀଙ୍କ ସିରମ୍ କିମ୍ବା ଟିସୁରେ ପ୍ୟୁରିନ୍ ମେଟାବୋଲିଜ୍ମ ସହିତ ଜଡିତ ମଧ୍ୟବର୍ତ୍ତୀଗୁଡ଼ିକ ଉଲ୍ଲେଖନୀୟ ଭାବରେ ବୃଦ୍ଧି ପାଇଥିଲା15,50। ଉଚ୍ଚ ସେରମ୍ ଜାନଥାଇନ୍ ଏବଂ ହାଇପୋକ୍ସାନ୍ଥାଇନ୍ ସ୍ତର ଦ୍ରୁତ ଭାବରେ ବୃଦ୍ଧି ପାଉଥିବା କର୍କଟ କୋଷ ଦ୍ୱାରା ଆବଶ୍ୟକ ଆନାବୋଲିଜିମ୍ ପ୍ରତିଫଳିତ କରିପାରେ। ଗ୍ଲୁକୋଜ୍ ମେଟାବୋଲିଜିମର ଅନିୟମିତତା ହେଉଛି କର୍କଟ ମେଟାବୋଲିଜିମର ଏକ ଜଣାଶୁଣା ଚିହ୍ନ। ଏଠାରେ, ଆମେ HC ଏବଂ BN ଗ୍ରୁପ୍ ତୁଳନାରେ LA ଗ୍ରୁପ୍ ରେ ପାଇରୁଭେଟ୍ ଏବଂ ଲାକ୍ଟେଟରେ ଏକ ଉଲ୍ଲେଖନୀୟ ବୃଦ୍ଧି ଦେଖିଲୁ, ଯାହା ନନ୍-ସ୍ମଲ୍ କୋଷ ଫୁସଫୁସ କର୍କଟ (NSCLC) ରୋଗୀ ଏବଂ ସୁସ୍ଥ ନିୟନ୍ତ୍ରଣର ସେରମ୍ ମେଟାବୋଲିକ୍ ପ୍ରୋଫାଇଲରେ ଗ୍ଲାଇକୋଲାଇଟିକ୍ ପାଥ୍ୱେ ଅସାଧାରଣତାର ପୂର୍ବ ରିପୋର୍ଟ ସହିତ ସୁସଙ୍ଗତ। ଫଳାଫଳଗୁଡ଼ିକ ସ୍ଥିର 52,53।
ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଭାବରେ, ଆମେ ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମାସର ସିରମରେ ପାଇରୁଭେଟ୍ ଏବଂ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ମେଟାବୋଲିଜିମ୍ ମଧ୍ୟରେ ଏକ ବିପରୀତ ସମ୍ପର୍କ ଦେଖିଲୁ। HC କିମ୍ବା BN ଗ୍ରୁପ୍ ତୁଳନାରେ LA ଗ୍ରୁପ୍ରେ ସେରମ୍ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ସ୍ତର ହ୍ରାସ ପାଇଥିଲା। ଆଶ୍ଚର୍ଯ୍ୟଜନକ ଭାବରେ, ଏକ ସମ୍ଭାବ୍ୟ ସମୂହ ବ୍ୟବହାର କରି ଏକ ପୂର୍ବ ବଡ଼-ସ୍ତରର ଅଧ୍ୟୟନରୁ ଜଣାପଡିଛି ଯେ ସଂଚାଳନ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ର ନିମ୍ନ ସ୍ତର ଫୁସଫୁସ କର୍କଟ 54 ର ବିପଦ ବୃଦ୍ଧି ସହିତ ଜଡିତ ଥିଲା। ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ହେଉଛି ଏକ ଅତ୍ୟାବଶ୍ୟକ ଆମିନୋ ଏସିଡ୍ ଯାହା ଆମେ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ଭାବରେ ଖାଦ୍ୟରୁ ପାଇଥାଉ। ଆମେ ଏହି ସିଦ୍ଧାନ୍ତରେ ପହଞ୍ଚିଛୁ ଯେ ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମାରେ ସେରମ୍ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ହ୍ରାସ ଏହି ମେଟାବୋଲାଇଟର ଦ୍ରୁତ ହ୍ରାସକୁ ପ୍ରତିଫଳିତ କରିପାରେ। ଏହା ଜଣାଶୁଣା ଯେ କାଇନୁରେନାଇନ୍ ପଥ ମାଧ୍ୟମରେ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ କ୍ୟାଟାବୋଲିଜିମ୍ ର ଶେଷ ଉତ୍ପାଦ ହେଉଛି ଡି ନୋଭୋ NAD+ ସଂଶ୍ଳେଷଣର ଉତ୍ସ। କାରଣ NAD+ ମୁଖ୍ୟତଃ ଉଦ୍ଧାର ପଥ ମାଧ୍ୟମରେ ଉତ୍ପାଦିତ ହୁଏ, ସ୍ୱାସ୍ଥ୍ୟ ଏବଂ ରୋଗରେ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ମେଟାବୋଲିଜିମ୍ ରେ NAD+ ର ଗୁରୁତ୍ୱ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯିବା ବାକି ଅଛି। TCGA ଡାଟାବେସର ଆମର ବିଶ୍ଳେଷଣରୁ ଜଣାପଡିଛି ଯେ ସାଧାରଣ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ତୁଳନାରେ ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମାରେ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ଟ୍ରାନ୍ସପୋର୍ଟର ଦ୍ରବଣ ପରିବହନକାରୀ 7A5 (SLC7A5)ର ପ୍ରକାଶନ ଯଥେଷ୍ଟ ବୃଦ୍ଧି ପାଇଥିଲା ଏବଂ ଗ୍ଲାଇକୋଲାଇଟିକ୍ ଏନଜାଇମ୍ GAPDHର ପ୍ରକାଶନ ସହିତ ସକାରାତ୍ମକ ଭାବରେ ସହଭାଗୀ ଥିଲା। ପୂର୍ବ ଅଧ୍ୟୟନଗୁଡ଼ିକ ମୁଖ୍ୟତଃ ଆଣ୍ଟିଟ୍ୟୁମର ଇମ୍ମ୍ୟୁନ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା40,41,42 ଦମନ କରିବାରେ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ କ୍ୟାଟାବୋଲିଜିମ୍ ର ଭୂମିକା ଉପରେ ଧ୍ୟାନ ଦେଇଛନ୍ତି। ଏଠାରେ ଆମେ ପ୍ରଦର୍ଶନ କରୁଛୁ ଯେ ଫୁସଫୁସ କର୍କଟ କୋଷରେ SLC7A5 କୁ ନକ୍ ଡାଉନ୍ କରି ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ଅପ୍ଟେକର ନିରୋଧ ପରେ ସେଲୁଲାର୍ NAD ସ୍ତର ହ୍ରାସ ଏବଂ ଗ୍ଲାଇକୋଲାଇଟିକ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପର ଏକ ସମକାଳୀନ ହ୍ରାସର ଫଳାଫଳ ଦେଇଥାଏ। ସଂକ୍ଷେପରେ, ଆମର ଅଧ୍ୟୟନ ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମାର ମାଲିଗ୍ନାଣ୍ଟ ରୂପାନ୍ତରଣ ସହିତ ଜଡିତ ସେରମ୍ ମେଟାବୋଲିଜିମ୍ ପରିବର୍ତ୍ତନ ପାଇଁ ଏକ ଜୈବିକ ଆଧାର ପ୍ରଦାନ କରେ।
NSCLC ରୋଗୀଙ୍କ ମଧ୍ୟରେ EGFR ମ୍ୟୁଟେସନ୍ ହେଉଛି ସବୁଠାରୁ ସାଧାରଣ ଡ୍ରାଇଭର ମ୍ୟୁଟେସନ୍। ଆମର ଅଧ୍ୟୟନରେ, ଆମେ ପାଇଲୁ ଯେ EGFR ମ୍ୟୁଟେସନ୍ (n = 41) ଥିବା ରୋଗୀମାନଙ୍କର ସାମଗ୍ରିକ ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ ପ୍ରୋଫାଇଲ୍ ୱାଇଲ୍ଡ-ଟାଇପ୍ EGFR (n = 31) ଥିବା ରୋଗୀଙ୍କ ପରି ଥିଲା, ଯଦିଓ ଆମେ ଆସାଇଲକାର୍ନାଇଟାଇନ୍ ରୋଗୀଙ୍କ ମଧ୍ୟରେ କିଛି EGFR ମ୍ୟୁଟେଣ୍ଟ୍ ରୋଗୀଙ୍କ ସିରମ୍ ସ୍ତର ହ୍ରାସ ପାଇଲୁ। ଆସାଇଲକାର୍ନାଇଟାଇନ୍‌ଗୁଡ଼ିକର ପ୍ରତିଷ୍ଠିତ କାର୍ଯ୍ୟ ହେଉଛି ସାଇଟୋପ୍ଲାଜମ୍ ରୁ ମାଇଟୋକଣ୍ଡ୍ରିଆଲ୍ ମ୍ୟାଟ୍ରିକ୍ସକୁ ଆସାଇଲ୍ ଗ୍ରୁପ୍ ପରିବହନ କରିବା, ଯାହା ଫଳରେ ଫ୍ୟାଟି ଏସିଡ୍‌ର ଅକ୍ସିଡେସନ୍ ଶକ୍ତି ଉତ୍ପାଦନ କରେ 55। ଆମର ନିଷ୍କର୍ଷ ସହିତ ସମନ୍ୱିତ, ଏକ ସାମ୍ପ୍ରତିକ ଅଧ୍ୟୟନ ମଧ୍ୟ 102 ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମା ଟିସୁ ନମୁନା 50 ର ଗ୍ଲୋବାଲ୍ ମେଟାବୋଲୋମ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ କରି EGFR ମ୍ୟୁଟେଣ୍ଟ୍ ଏବଂ EGFR ୱାଇଲ୍ଡ-ଟାଇପ୍ ଟ୍ୟୁମର ମଧ୍ୟରେ ସମାନ ମେଟାବୋଲୋମ୍ ପ୍ରୋଫାଇଲ୍ ଚିହ୍ନଟ କରିଛି। ଆକର୍ଷଣୀୟ ଭାବରେ, EGFR ମ୍ୟୁଟେଣ୍ଟ୍ ଗୋଷ୍ଠୀରେ ମଧ୍ୟ ଆସାଇଲକାର୍ନାଇଟାଇନ୍ ବିଷୟବସ୍ତୁ ମିଳିଥିଲା। ତେଣୁ, ଆସାଇଲକାର୍ନାଇଟାଇନ୍ ସ୍ତରର ପରିବର୍ତ୍ତନ EGFR-ପ୍ରେରିତ ମେଟାବୋଲିକ୍ ପରିବର୍ତ୍ତନକୁ ପ୍ରତିଫଳିତ କରେ କି ନାହିଁ ଏବଂ ଅନ୍ତର୍ନିହିତ ଆଣବିକ ପଥଗୁଡ଼ିକ ଅଧିକ ଅଧ୍ୟୟନ କରିବା ଉଚିତ କି ନାହିଁ।
ଶେଷରେ, ଆମର ଅଧ୍ୟୟନ ଫୁସଫୁସ ନୋଡୁଲ୍ସର ବିଭେଦକ ନିର୍ଣ୍ଣୟ ପାଇଁ ଏକ ସେରମ୍ ମେଟାବୋଲିକ୍ ବର୍ଗୀକରଣ ସ୍ଥାପନ କରେ ଏବଂ ଏକ କାର୍ଯ୍ୟପ୍ରଣାଳୀ ପ୍ରସ୍ତାବ ଦିଏ ଯାହା ବିପଦ ମୂଲ୍ୟାୟନକୁ ଅପ୍ଟିମାଇଜ୍ କରିପାରିବ ଏବଂ CT ସ୍କାନ ସ୍କ୍ରିନିଂ ଉପରେ ଆଧାରିତ କ୍ଲିନିକାଲ୍ ପରିଚାଳନାକୁ ସହଜ କରିପାରିବ।
ଏହି ଅଧ୍ୟୟନକୁ ସନ୍ ୟାଟ୍-ସେନ୍ ବିଶ୍ୱବିଦ୍ୟାଳୟ କର୍କଟ ହସ୍ପିଟାଲର ନୀତି କମିଟି, ସନ୍ ୟାଟ୍-ସେନ୍ ବିଶ୍ୱବିଦ୍ୟାଳୟର ପ୍ରଥମ ଆଫିଲିଏଟେଡ୍ ହସ୍ପିଟାଲ ଏବଂ ଝେଙ୍ଗଝୋ ବିଶ୍ୱବିଦ୍ୟାଳୟ କର୍କଟ ହସ୍ପିଟାଲର ନୀତି କମିଟି ଦ୍ୱାରା ଅନୁମୋଦିତ କରାଯାଇଥିଲା। ଆବିଷ୍କାର ଏବଂ ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ବୈଧତା ଗୋଷ୍ଠୀରେ, କର୍କଟ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଏବଂ ନିବାରଣ ବିଭାଗ, ସନ୍ ୟାଟ୍-ସେନ୍ ବିଶ୍ୱବିଦ୍ୟାଳୟ କର୍କଟ କେନ୍ଦ୍ରରେ ବାର୍ଷିକ ଡାକ୍ତରୀ ପରୀକ୍ଷା କରୁଥିବା ବ୍ୟକ୍ତିମାନଙ୍କଠାରୁ ସୁସ୍ଥ ବ୍ୟକ୍ତିଙ୍କଠାରୁ ୧୭୪ ସେରା ଏବଂ ସୌମ୍ୟ ନୋଡୁଲ୍ସରୁ ୨୪୪ ସେରା ସଂଗ୍ରହ କରାଯାଇଥିଲା। ସେରମ୍। ସନ୍ ୟାଟ୍-ସେନ୍ ବିଶ୍ୱବିଦ୍ୟାଳୟ କର୍କଟ କେନ୍ଦ୍ରରୁ ପର୍ଯ୍ୟାୟ I ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମା ସଂଗ୍ରହ କରାଯାଇଥିଲା। ବାହ୍ୟ ବୈଧତା ଗୋଷ୍ଠୀରେ, ସୌମ୍ୟ ନୋଡୁଲ୍ସର ୪୮ଟି ମାମଲା, ସନ୍ ୟାଟ୍-ସେନ୍ ବିଶ୍ୱବିଦ୍ୟାଳୟର ପ୍ରଥମ ଆଫିଲିଏଟେଡ୍ ହସ୍ପିଟାଲରୁ ପର୍ଯ୍ୟାୟ I ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମାର ୩୯ଟି ମାମଲା ଏବଂ ଝେଙ୍ଗଝୋ କର୍କଟ ହସ୍ପିଟାଲରୁ ପର୍ଯ୍ୟାୟ I ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମାର ୨୪ଟି ମାମଲା ଥିଲା। ସନ୍ ୟାଟ୍-ସେନ୍ ବିଶ୍ୱବିଦ୍ୟାଳୟ କର୍କଟ କେନ୍ଦ୍ର ମଧ୍ୟ ପ୍ରତିଷ୍ଠିତ ମେଟାବୋଲିକ୍ ବର୍ଗୀକରଣର ରୋଗ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କ୍ଷମତା ପରୀକ୍ଷା କରିବା ପାଇଁ ପର୍ଯ୍ୟାୟ I ସ୍କ୍ୱାମସ୍ କୋଲ୍ ଫୁସଫୁସ କର୍କଟ ରୋଗର 16 ଟି ମାମଲା ସଂଗ୍ରହ କରିଥିଲା ​​(ରୋଗୀ ଗୁଣାବଳୀ ପରିପୂରକ ସାରଣୀ 5 ରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି)। ଜାନୁଆରୀ 2018 ଏବଂ ମଇ 2020 ମଧ୍ୟରେ ଡିସକଭରୀ କୋହର୍ଟ ଏବଂ ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ବୈଧତା ଗୋଷ୍ଠୀରୁ ନମୁନା ସଂଗ୍ରହ କରାଯାଇଥିଲା। ଅଗଷ୍ଟ 2021 ଏବଂ ଅକ୍ଟୋବର 2022 ମଧ୍ୟରେ ବାହ୍ୟ ବୈଧତା ଗୋଷ୍ଠୀ ପାଇଁ ନମୁନା ସଂଗ୍ରହ କରାଯାଇଥିଲା। ଲିଙ୍ଗ ପକ୍ଷପାତକୁ କମ କରିବା ପାଇଁ, ପ୍ରତ୍ୟେକ ଗୋଷ୍ଠୀକୁ ପ୍ରାୟ ସମାନ ସଂଖ୍ୟକ ପୁରୁଷ ଏବଂ ମହିଳା ମାମଲା ଦିଆଯାଇଥିଲା। ଡିସକଭରୀ ଦଳ ଏବଂ ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ସମୀକ୍ଷା ଦଳ। ଆତ୍ମ-ରିପୋର୍ଟ ଆଧାରରେ ଅଂଶଗ୍ରହଣକାରୀଙ୍କ ଲିଙ୍ଗ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଇଥିଲା। ସମସ୍ତ ଅଂଶଗ୍ରହଣକାରୀଙ୍କଠାରୁ ସୂଚିତ ସମ୍ମତି ଗ୍ରହଣ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ କୌଣସି କ୍ଷତିପୂରଣ ପ୍ରଦାନ କରାଯାଇ ନଥିଲା। ସୌମ୍ୟ ନୋଡୁଲ୍ସ ଥିବା ବିଷୟଗୁଡ଼ିକ ଥିଲେ ଯେଉଁମାନେ ବିଶ୍ଳେଷଣ ସମୟରେ 2 ରୁ 5 ବର୍ଷ ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ସ୍ଥିର ସିଟି ସ୍କାନ ସ୍କୋର ପାଇଥିଲେ, ବାହ୍ୟ ବୈଧତା ନମୁନାରୁ 1 ଟି ମାମଲା ବ୍ୟତୀତ, ଯାହାକୁ ଅସ୍ତ୍ରୋପଚାର ପୂର୍ବରୁ ସଂଗ୍ରହ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ହିଷ୍ଟୋପାଥୋଲୋଜି ଦ୍ୱାରା ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଇଥିଲା। କ୍ରନିକ୍ ବ୍ରୋଙ୍କାଇଟିସ୍ ବ୍ୟତିକ୍ରମ ସହିତ। ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମା ମାମଲାଗୁଡ଼ିକ ଫୁସଫୁସ ରିସେକ୍ସନ ପୂର୍ବରୁ ସଂଗ୍ରହ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ପାଥୋଲୋଜିକାଲ ନିର୍ଣ୍ଣୟ ଦ୍ୱାରା ନିଶ୍ଚିତ କରାଯାଇଥିଲା। କୌଣସି ଆଣ୍ଟିକ୍ୱାଗୁଲେଣ୍ଟ ବିନା ସେରମ୍ ପୃଥକୀକରଣ ଟ୍ୟୁବ୍‌ରେ ଉପବାସ ରକ୍ତ ନମୁନା ସଂଗ୍ରହ କରାଯାଇଥିଲା। ରକ୍ତ ନମୁନାଗୁଡ଼ିକୁ କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ 1 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ ଜମାଟ ବାନ୍ଧି ଦିଆଯାଇଥିଲା ଏବଂ ତା’ପରେ ସେରମ୍ ସୁପରନାଟାଣ୍ଟ ସଂଗ୍ରହ କରିବା ପାଇଁ 4°C ରେ 10 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ 2851 × g ରେ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫ୍ୟୁଗ୍ କରାଯାଇଥିଲା। ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ନିଷ୍କାସନ ନହେବା ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ସେରମ୍ ଆଲିକୋଟ୍ -80°C ରେ ଫ୍ରିଜ୍ କରାଯାଇଥିଲା। ସନ୍ ୟାଟ୍-ସେନ୍ ବିଶ୍ୱବିଦ୍ୟାଳୟ କର୍କଟ କେନ୍ଦ୍ରର କର୍କଟ ନିବାରଣ ଏବଂ ଡାକ୍ତରୀ ପରୀକ୍ଷା ବିଭାଗ 100 ଜଣ ସୁସ୍ଥ ଦାତାଙ୍କଠାରୁ ସେରମ୍ ର ଏକ ପୁଲ୍ ସଂଗ୍ରହ କରିଥିଲା, ଯେଉଁଥିରେ 40 ରୁ 55 ବର୍ଷ ବୟସର ପୁରୁଷ ଏବଂ ମହିଳା ସମାନ ସଂଖ୍ୟକ ଥିଲେ। ପ୍ରତ୍ୟେକ ଦାତା ନମୁନାର ସମାନ ପରିମାଣ ମିଶ୍ରିତ ହୋଇଥିଲା, ପରିଣାମ ସ୍ୱରୂପ ପୁଲ୍ କୁ -80°C ରେ ଅଲିକୋଟ୍ କରାଯାଇ ସଂରକ୍ଷଣ କରାଯାଇଥିଲା। ଗୁଣବତ୍ତା ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଏବଂ ତଥ୍ୟ ମାନକୀକରଣ ପାଇଁ ସେରମ୍ ମିଶ୍ରଣକୁ ସନ୍ଦର୍ଭ ସାମଗ୍ରୀ ଭାବରେ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା।
ରେଫରେନ୍ସ ସିରମ୍ ଏବଂ ପରୀକ୍ଷଣ ନମୁନାଗୁଡ଼ିକୁ ତରଳାଇ ଏକ ମିଳିତ ନିଷ୍କାସନ ପଦ୍ଧତି (MTBE/ମିଥାନଲ୍/ପାଣି) 56 ବ୍ୟବହାର କରି ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ବାହାର କରାଯାଇଥିଲା। ସଂକ୍ଷେପରେ, 50 μl ସିରମ୍ 225 μl ବରଫ-ଥଣ୍ଡା ମିଥାନଲ୍ ଏବଂ 750 μl ବରଫ-ଥଣ୍ଡା ମିଥାନଲ୍ ଟର୍ଟ-ବ୍ୟୁଟାଇଲ୍ ଇଥର (MTBE) ସହିତ ମିଶ୍ରିତ ହୋଇଥିଲା। ମିଶ୍ରଣକୁ ହଲାନ୍ତୁ ଏବଂ 1 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ ବରଫ ଉପରେ ଇନ୍କ୍ୟୁବେଟ୍ କରନ୍ତୁ। ତା'ପରେ ନମୁନାଗୁଡ଼ିକୁ ମିଶ୍ରିତ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ 188 μl MS-ଗ୍ରେଡ୍ ପାଣି ସହିତ ଭୋର୍ଟେକ୍ସ ମିଶ୍ରିତ କରାଯାଇଥିଲା ଯାହା ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ମାନକ (13C-ଲାକ୍ଟେଟ୍, 13C3-ପାଇରୁଭେଟ୍, 13C-ମେଥିଓନାଇନ୍, ଏବଂ 13C6-ଆଇସୋଲୁସିନ୍, କ୍ୟାମ୍ବ୍ରିଜ୍ ଆଇସୋଟୋପ୍ ଲାବୋରେଟୋରିଜ୍ ରୁ କିଣାଯାଇଥିଲା) ଥିଲା। ମିଶ୍ରଣକୁ ତା'ପରେ 15,000 × g ରେ 10 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ 4 °C ରେ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫ୍ୟୁଗ୍ କରାଯାଇଥିଲା, ଏବଂ ନିମ୍ନ ପର୍ଯ୍ୟାୟକୁ LC-MS ବିଶ୍ଳେଷଣ ପାଇଁ ଦୁଇଟି ଟ୍ୟୁବ୍ (ପ୍ରତ୍ୟେକ 125 μL) ରେ ସକାରାତ୍ମକ ଏବଂ ନକାରାତ୍ମକ ମୋଡ୍ ରେ ସ୍ଥାନାନ୍ତରିତ କରାଯାଇଥିଲା। ଶେଷରେ, ନମୁନାକୁ ଏକ ଉଚ୍ଚ-ଗତି ବିଶିଷ୍ଟ ଭାକ୍ୟୁମ୍ କନସେଣ୍ଟ୍ରେଟରରେ ଶୁଷ୍କ ହେବା ପାଇଁ ବାଷ୍ପୀଭୂତ କରାଯାଇଥିଲା।
ଶୁଖିଲା ମେଟାବୋଲାଇଟଗୁଡ଼ିକୁ 80% ଆସେଟୋନିଟ୍ରାଇଲର 120 μl ରେ ପୁନଃଗଠିତ କରାଯାଇଥିଲା, 5 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ଘୂର୍ଣ୍ଣନ କରାଯାଇଥିଲା, ଏବଂ 4°C ରେ 10 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ 15,000 × g ରେ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫ୍ୟୁଗ୍ କରାଯାଇଥିଲା। ମେଟାବୋଲିମିକ୍ସ ଅଧ୍ୟୟନ ପାଇଁ ସୁପରନାଟାଣ୍ଟଗୁଡ଼ିକୁ ମାଇକ୍ରୋଇନ୍ସର୍ଟ ସହିତ ଆମ୍ବର ଗ୍ଲାସ ଭାଏଲ୍ସରେ ସ୍ଥାନାନ୍ତରିତ କରାଯାଇଥିଲା। ଏକ ଅଲ୍ଟ୍ରା-ପର୍ଫର୍ମାନ୍ସ ଲିକ୍ୱିଡ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି-ହାଇ-ରିଜୋଲ୍ୟୁସନ୍ ମାସ୍ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରୋମେଟ୍ରି (UPLC-HRMS) ପ୍ଲାଟଫର୍ମରେ ଅଣଲକ୍ଷ୍ୟିତ ମେଟାବୋଲିମିକ୍ସ ବିଶ୍ଳେଷଣ। ଏକ ଡାୟୋନେକ୍ସ ଅଲ୍ଟିମେଟ୍ 3000 UPLC ସିଷ୍ଟମ୍ ଏବଂ ଏକ ACQUITY BEH Amide ସ୍ତମ୍ଭ (2.1 × 100 mm, 1.7 μm, Waters) ବ୍ୟବହାର କରି ମେଟାବୋଲାଇଟଗୁଡ଼ିକୁ ପୃଥକ କରାଯାଇଥିଲା। ସକାରାତ୍ମକ ଆୟନ୍ ମୋଡ୍ ରେ, ମୋବାଇଲ୍ ପର୍ଯ୍ୟାୟଗୁଡ଼ିକ 95% (A) ଏବଂ 50% ଆସେଟୋନିଟ୍ରାଇଲ୍ (B) ଥିଲା, ପ୍ରତ୍ୟେକରେ 10 mmol/L ଆମୋନିୟମ୍ ଆସେଟେଟ୍ ଏବଂ 0.1% ଫର୍ମିକ ଏସିଡ୍ ଥିଲା। ନକାରାତ୍ମକ ମୋଡ୍‌ରେ, ମୋବାଇଲ୍ ପର୍ଯ୍ୟାୟ A ଏବଂ B ରେ ଯଥାକ୍ରମେ 95% ଏବଂ 50% ଆସେଟୋନିଟ୍ରାଇଲ୍ ଥିଲା, ଉଭୟ ପର୍ଯ୍ୟାୟରେ 10 mmol/L ଆମୋନିୟମ୍ ଆସେଟେଟ୍ ଥିଲା, pH = 9। ଗ୍ରେଡିଏଣ୍ଟ ପ୍ରୋଗ୍ରାମଟି ନିମ୍ନଲିଖିତ ଥିଲା: 0–0.5 ମିନିଟ୍, 2% B; 0.5–12 ମିନିଟ୍, 2–50% B; 12–14 ମିନିଟ୍, 50–98% B; 14–16 ମିନିଟ୍, 98% B; 16–16.1. ମିନିଟ୍, 98 –2% B; 16.1–20 ମିନିଟ୍, 2% B। ଅଟୋସାମ୍ପଲରରେ ସ୍ତମ୍ଭକୁ 40°C ଏବଂ ନମୁନାକୁ 10°C ରେ ରଖାଯାଇଥିଲା। ପ୍ରବାହ ହାର 0.3 ml/ମିନିଟ୍ ଥିଲା, ଇଞ୍ଜେକ୍ସନ ପରିମାଣ 3 μl ଥିଲା। ଏକ Q-Exactive Orbitrap mass spectrometer (Thermo Fisher Scientific) ଏକ electrospray ionization (ESI) ଉତ୍ସ ସହିତ ପୂର୍ଣ୍ଣ ସ୍କାନ ମୋଡ୍ ରେ ପରିଚାଳିତ ହୋଇଥିଲା ଏବଂ ddMS2 ମନିଟରିଂ ମୋଡ୍ ସହିତ ଯୋଡା ଯାଇଥିଲା ଯାହା ଦ୍ୱାରା ବହୁ ପରିମାଣର ତଥ୍ୟ ସଂଗ୍ରହ କରାଯାଇଥିଲା। MS ପାରାମିଟରଗୁଡ଼ିକ ନିମ୍ନଲିଖିତ ଭାବରେ ସେଟ୍ କରାଯାଇଥିଲା: ସ୍ପ୍ରେ ଭୋଲଟେଜ +3.8 kV/- 3.2 kV, କୈଶିକ ତାପମାତ୍ରା 320°C, ସୁରକ୍ଷା ଗ୍ୟାସ୍ 40 arb, ସହାୟକ ଗ୍ୟାସ୍ 10 arb, ପ୍ରୋବ୍ ହିଟର୍ ତାପମାତ୍ରା 350°C, ସ୍କାନିଂ ପରିସର 70-1050 m/h, ରିଜୋଲ୍ୟୁସନ୍। 70 000। Xcalibur 4.1 (Thermo Fisher Scientific) ବ୍ୟବହାର କରି ତଥ୍ୟ ହାସଲ କରାଯାଇଥିଲା।
ତଥ୍ୟ ଗୁଣବତ୍ତା ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ ପାଇଁ, ପ୍ରତ୍ୟେକ ନମୁନାରୁ 10 μL ସୁପରନାଟାଣ୍ଟ ଆଲିକୋଟ୍ ଅପସାରଣ କରି ପୁଲ୍ ହୋଇଥିବା ଗୁଣବତ୍ତା ନିୟନ୍ତ୍ରଣ (QC) ନମୁନା ସୃଷ୍ଟି କରାଯାଇଥିଲା। UPLC-MS ସିଷ୍ଟମର ସ୍ଥିରତା ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରିବା ପାଇଁ ବିଶ୍ଳେଷଣାତ୍ମକ କ୍ରମର ଆରମ୍ଭରେ ଛଅଟି ଗୁଣବତ୍ତା ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ନମୁନା ଇଞ୍ଜେକ୍ସନ ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା। ଗୁଣବତ୍ତା ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ନମୁନାଗୁଡ଼ିକୁ ତା'ପରେ ବ୍ୟାଚରେ ସମୟାନୁସାରେ ପ୍ରଚଳନ କରାଯାଇଥିଲା। ଏହି ଅଧ୍ୟୟନରେ ଥିବା ସମସ୍ତ 11 ବ୍ୟାଚ ସେରମ୍ ନମୁନାକୁ LC-MS ଦ୍ୱାରା ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା। ନିଷ୍କାସନ ପ୍ରକ୍ରିୟାକୁ ନିରୀକ୍ଷଣ କରିବା ଏବଂ ବ୍ୟାଚ-ଟୁ-ବ୍ୟାଚ ପ୍ରଭାବ ପାଇଁ ଆଡଜଷ୍ଟ କରିବା ପାଇଁ 100 ଜଣ ସୁସ୍ଥ ଦାତାଙ୍କଠାରୁ ଏକ ସେରମ୍ ପୁଲ୍ ମିଶ୍ରଣର ଆଲିକୋଟ୍ ସମ୍ପୃକ୍ତ ବ୍ୟାଚରେ ସନ୍ଦର୍ଭ ସାମଗ୍ରୀ ଭାବରେ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା। ସନ୍ ୟାଟ୍-ସେନ୍ ବିଶ୍ୱବିଦ୍ୟାଳୟର ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ସ ସେଣ୍ଟରରେ ଆବିଷ୍କାର କୋହର୍ଟ, ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ବୈଧତା କୋହର୍ଟ ଏବଂ ବାହ୍ୟ ବୈଧତା କୋହର୍ଟର ଲକ୍ଷ୍ୟହୀନ ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ସ ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା। ଗୁଆଙ୍ଗଡୋଙ୍ଗ୍ ୟୁନିଭର୍ସିଟି ଅଫ୍ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି ଆନାଲିସିସ୍ ଆଣ୍ଡ୍ ପରୀକ୍ଷଣ କେନ୍ଦ୍ରର ବାହ୍ୟ ପ୍ରୟୋଗଶାଳା ମଧ୍ୟ ବର୍ଗୀକୃତ ମଡେଲର କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତା ପରୀକ୍ଷା କରିବା ପାଇଁ ବାହ୍ୟ କୋହର୍ଟରୁ 40 ଟି ନମୁନା ବିଶ୍ଳେଷଣ କରିଥିଲା।
ନିଷ୍କାସନ ଏବଂ ପୁନର୍ଗଠନ ପରେ, ମଲ୍ଟିପଲ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ମନିଟରିଂ (MRM) ମୋଡ୍‌ରେ ଏକ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋସ୍ପ୍ରେ ଆୟନାଇଜେସନ୍ (ESI) ଉତ୍ସ ସହିତ ଅଲ୍ଟ୍ରା-ହାଇ ପରଫରମାନ୍ସ ଲିକ୍ୱିଡ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି-ଟାଣ୍ଡେମ୍ ମାସ୍ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରୋମେଟ୍ରି (Agilent 6495 ଟ୍ରିପଲ୍ କ୍ୱାଡ୍ରୁପୋଲ୍) ବ୍ୟବହାର କରି ସେରମ୍ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ସର ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ପରିମାଣ ମାପ କରାଯାଇଥିଲା। ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ସକୁ ପୃଥକ କରିବା ପାଇଁ ଏକ ACQUITY BEH Amide ସ୍ତମ୍ଭ (2.1 × 100 mm, 1.7 μm, Waters) ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା। ମୋବାଇଲ୍ ପର୍ଯ୍ୟାୟରେ 90% (A) ଏବଂ 5% ଆସେଟୋନିଟ୍ରାଇଲ୍ (B) ସହିତ 10 mmol/L ଆମୋନିୟମ୍ ଆସେଟେଟ୍ ଏବଂ 0.1% ଆମୋନିଆ ଦ୍ରବଣ ଥିଲା। ଗ୍ରେଡିଏଣ୍ଟ ପ୍ରୋଗ୍ରାମ୍ ନିମ୍ନଲିଖିତ ଥିଲା: 0-1.5 ମିନିଟ୍, 0% B; 1.5-6.5 ମିନିଟ୍, 0-15% B; 6.5-8 ମିନିଟ୍, 15% B; 8-8.5 ମିନିଟ୍, 15%–0% B; 8.5-11.5 ମିନିଟ୍, 0% B। ଅଟୋସାମ୍ପଲରରେ ସ୍ତମ୍ଭଟି 40 °C ଏବଂ ନମୁନାକୁ 10 °C ରେ ରଖାଯାଇଥିଲା। ପ୍ରବାହ ହାର 0.3 mL/ମିନିଟ୍ ଏବଂ ଇଞ୍ଜେକ୍ସନ ପରିମାଣ 1 μL ଥିଲା। MS ପାରାମିଟରଗୁଡ଼ିକ ନିମ୍ନଲିଖିତ ଭାବରେ ସେଟ୍ କରାଯାଇଥିଲା: କୈପିଲାରି ଭୋଲଟେଜ୍ ±3.5 kV, ନେବୁଲାଇଜର ଚାପ 35 psi, ସିଥ୍ ଗ୍ୟାସ୍ ପ୍ରବାହ 12 L/ମିନିଟ୍, ସିଥ୍ ଗ୍ୟାସ୍ ତାପମାତ୍ରା 350°C, ଶୁଖାଇବା ଗ୍ୟାସ୍ ତାପମାତ୍ରା 250°C, ଏବଂ ଶୁଖାଇବା ଗ୍ୟାସ୍ ପ୍ରବାହ 14 l/ମିନିଟ୍। ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍, ପାଇରୁଭେଟ୍, ଲାକ୍ଟେଟ୍, ହାଇପୋକ୍ସାନ୍ଥାଇନ୍ ଏବଂ ଜାନ୍ଥାଇନ୍ ର MRM ରୂପାନ୍ତର ଯଥାକ୍ରମେ 205.0–187.9, 87.0–43.4, 89.0–43.3, 135.0–92.3 ଏବଂ 151.0–107.9 ଥିଲା। ମାସ ହଣ୍ଟର B.07.00 (Agilent Technologies) ବ୍ୟବହାର କରି ତଥ୍ୟ ସଂଗ୍ରହ କରାଯାଇଥିଲା। ସିରମ୍ ନମୁନା ପାଇଁ, ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍, ପାଇରୁଭେଟ୍, ଲାକ୍ଟେଟ୍, ହାଇପୋକ୍ସାନ୍ଥିନ ଏବଂ ଜାନଥାଇନ୍ ମାନକ ମିଶ୍ରଣ ସମାଧାନର କାଲିବ୍ରେସନ୍ କର୍ଭ ବ୍ୟବହାର କରି ପରିମାଣିତ କରାଯାଇଥିଲା। କୋଷ ନମୁନା ପାଇଁ, ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ବିଷୟବସ୍ତୁକୁ ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ମାନକ ଏବଂ କୋଷ ପ୍ରୋଟିନ୍ ବସ୍ତୁ ଅନୁସାରେ ସ୍ୱାଭାବିକ କରାଯାଇଥିଲା।
କମ୍ପାଉଣ୍ଡ ଡିସ୍କଭରୀ 3.1 ଏବଂ ଟ୍ରେସଫାଇଣ୍ଡର 4.0 (ଥର୍ମୋ ଫିସର ସାଇଣ୍ଟିଫିକ୍) ବ୍ୟବହାର କରି ଶିଖର ନିଷ୍କାସନ (m/z ଏବଂ ପ୍ରତିଧାରଣ ସମୟ (RT)) କରାଯାଇଥିଲା। ବ୍ୟାଚଗୁଡ଼ିକ ମଧ୍ୟରେ ସମ୍ଭାବ୍ୟ ପାର୍ଥକ୍ୟକୁ ଦୂର କରିବା ପାଇଁ, ପରୀକ୍ଷା ନମୁନାର ପ୍ରତ୍ୟେକ ଗୁଣାତ୍ମକ ଶିଖରକୁ ସମାନ ବ୍ୟାଚରୁ ସନ୍ଦର୍ଭ ସାମଗ୍ରୀର ସନ୍ଦର୍ଭ ଶିଖର ଦ୍ୱାରା ବିଭାଜିତ କରାଯାଇଥିଲା ଯାହା ଦ୍ୱାରା ଆପେକ୍ଷିକ ପ୍ରଚୁରତା ପ୍ରାପ୍ତ ହୋଇଥିଲା। ମାନକୀକରଣ ପୂର୍ବରୁ ଏବଂ ପରେ ଆଭେଦ୍ୟ ମାନକର ଆପେକ୍ଷିକ ମାନକ ବିଚ୍ୟୁତି ପରିପୂରକ ସାରଣୀ 6 ରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି। ଦୁଇଟି ଗୋଷ୍ଠୀ ମଧ୍ୟରେ ପାର୍ଥକ୍ୟ ମିଥ୍ୟା ଆବିଷ୍କାର ହାର (FDR<0.05, Wilcoxon ସାଇନ୍ଡ୍ ରାଙ୍କ୍ ପରୀକ୍ଷା) ଏବଂ ଫୋଲ୍ଡ ପରିବର୍ତ୍ତନ (>1.2 କିମ୍ବା <0.83) ଦ୍ୱାରା ବର୍ଣ୍ଣିତ ହୋଇଥିଲା। ନିଷ୍କାସିତ ବ features ଶିଷ୍ଟ୍ୟଗୁଡ଼ିକର କଞ୍ଚା MS ତଥ୍ୟ ଏବଂ ସନ୍ଦର୍ଭ ସେରମ୍-ସଂଶୋଧିତ MS ତଥ୍ୟ ଯଥାକ୍ରମେ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ଡାଟା 1 ଏବଂ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ଡାଟା 2 ରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି। ଚିହ୍ନଟର ଚାରୋଟି ପରିଭାଷିତ ସ୍ତର ଉପରେ ଆଧାର କରି ଶିଖର ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରାଯାଇଥିଲା, ଯେଉଁଥିରେ ଚିହ୍ନଟ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ସ, କଥିତ ଭାବରେ ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରାଯାଇଥିବା ଯୌଗିକ, କଥିତ ଭାବରେ ବର୍ଣ୍ଣିତ ଯୌଗିକ ଶ୍ରେଣୀ ଏବଂ ଅଜଣା ଯୌଗିକ 22 ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ। କମ୍ପାଉଣ୍ଡ ଡିସ୍କଭରୀ 3.1 (mzCloud, HMDB, Chemspider) ରେ ଡାଟାବେସ୍ ସନ୍ଧାନ ଉପରେ ଆଧାର କରି, mzCloud (ସ୍କୋର > 85) କିମ୍ବା Chemspider ରେ ବୈଧ ମାନକ କିମ୍ବା ସଠିକ ମେଳ ଆନୋଟେସନ୍ ସହିତ MS/MS ମେଳ ​​ଖାଉଥିବା ଜୈବିକ ଯୌଗିକଗୁଡ଼ିକୁ ଶେଷରେ ଡିଫରେନ୍ସିଆଲ୍ ମେଟାବୋଲୋମ୍ ମଧ୍ୟରେ ମଧ୍ୟସ୍ଥି ଭାବରେ ଚୟନ କରାଯାଇଥିଲା। ପ୍ରତ୍ୟେକ ବୈଶିଷ୍ଟ୍ୟ ପାଇଁ ଶିଖର ଆନୋଟେସନ୍ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ଡାଟା 3 ରେ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରାଯାଇଛି। MetaboAnalyst 5.0 କୁ ସମ-ସାଧାରଣକୃତ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ପ୍ରଚୁରତାର ଏକପରିବର୍ତ୍ତନୀୟ ବିଶ୍ଳେଷଣ ପାଇଁ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା। MetaboAnalyst 5.0 ମଧ୍ୟ KEGG ପଥ ସମୃଦ୍ଧି ବିଶ୍ଳେଷଣକୁ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରିଥିଲା ​​ଯାହା ଉଲ୍ଲେଖନୀୟ ଭାବରେ ଭିନ୍ନ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ଉପରେ ଆଧାରିତ ଥିଲା। ପ୍ରିନ୍ସିପାଲ କମ୍ପୋନେଣ୍ଟ ବିଶ୍ଳେଷଣ (PCA) ଏବଂ ଆଂଶିକ ସର୍ବନିମ୍ନ ବର୍ଗ ଡିସକ୍ରିମ୍ୟାଣ୍ଟ ବିଶ୍ଳେଷଣ (PLS-DA) କୁ ଷ୍ଟାକ୍ ସାଧାରଣୀକରଣ ଏବଂ ଅଟୋସ୍କେଲିଂ ସହିତ ropls ସଫ୍ଟୱେର୍ ପ୍ୟାକେଜ୍ (v.1.26.4) ବ୍ୟବହାର କରି ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା। ନୋଡ୍ୟୁଲ୍ ମାଲିଗ୍ନାନ୍ସିର ପୂର୍ବାନୁମାନ କରିବା ପାଇଁ ସର୍ବୋତ୍ତମ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ବାୟୋମାର୍କର୍ ମଡେଲ୍ ସର୍ବନିମ୍ନ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ସଙ୍କୋଚନ ଏବଂ ଚୟନ ଅପରେଟର୍ (LASSO, R ପ୍ୟାକେଜ୍ v.4.1-3) ସହିତ ବାଇନାରୀ ଲଜିଷ୍ଟିକ୍ ରିଗ୍ରେସନ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ସୃଷ୍ଟି କରାଯାଇଥିଲା। ଚିହ୍ନଟ ଏବଂ ବୈଧତା ସେଟ୍‌ଗୁଡ଼ିକରେ ବିଭେଦକ ମଡେଲର କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତା pROC ପ୍ୟାକେଜ୍ (v.1.18.0.) ଅନୁଯାୟୀ ROC ବିଶ୍ଳେଷଣ ଉପରେ ଆଧାରିତ AUC ଆକଳନ କରି ବର୍ଣ୍ଣିତ ହୋଇଥିଲା। ମଡେଲର ସର୍ବାଧିକ ୟୁଡେନ୍ ସୂଚକାଙ୍କ (ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା + ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା - 1) ଉପରେ ଆଧାର କରି ସର୍ବୋତ୍ତମ ସମ୍ଭାବନା କଟଅଫ୍ ପ୍ରାପ୍ତ ହୋଇଥିଲା। ସୀମାଠାରୁ କମ୍ କିମ୍ବା ଅଧିକ ମୂଲ୍ୟ ଥିବା ନମୁନାଗୁଡ଼ିକୁ ଯଥାକ୍ରମେ ସୌମ୍ୟ ନୋଡୁଲ୍ସ ଏବଂ ଫୁସଫୁସ ଆଡେନୋକାର୍ସିନୋମା ଭାବରେ ପୂର୍ବାନୁମାନ କରାଯିବ।
A549 କୋଷଗୁଡ଼ିକ (#CCL-185, ଆମେରିକୀୟ ପ୍ରକାର ସଂସ୍କୃତି ସଂଗ୍ରହ) 10% FBS ଧାରଣ କରିଥିବା F-12K ମାଧ୍ୟମରେ ଚାଷ କରାଯାଇଥିଲା। SLC7A5 କୁ ଟାର୍ଗେଟ କରୁଥିବା ଛୋଟ ହେୟାରପିନ୍ RNA (shRNA) କ୍ରମ ଏବଂ ଏକ ଅଣ-ଲକ୍ଷ୍ୟ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ (NC) ଲେଣ୍ଟିଭାଇରାଲ୍ ଭେକ୍ଟର pLKO.1-puro ରେ ସନ୍ନିବେଶିତ ହୋଇଥିଲା। shSLC7A5 ର ଆଣ୍ଟିସେନ୍ସ କ୍ରମଗୁଡ଼ିକ ନିମ୍ନଲିଖିତ: Sh1 (5′-GGAGAAAACCTGATGAACAGTT-3′), Sh2 (5′-GCCGTGGACTTCGGGAACTAT-3′)। SLC7A5 (#5347) ଏବଂ ଟ୍ୟୁବୁଲିନ୍ (#2148) ପାଇଁ ଆଣ୍ଟିବଡି ସେଲ୍ ସିଗନାଲିଂ ଟେକ୍ନୋଲୋଜିରୁ କିଣାଯାଇଥିଲା। ପଶ୍ଚିମ ବ୍ଲଟ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ ପାଇଁ SLC7A5 ଏବଂ ଟ୍ୟୁବୁଲିନ୍ ପାଇଁ ଆଣ୍ଟିବଡି 1:1000 ର ଡିଲୁଏସନ୍ ରେ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା।
ସିହର୍ସ XF ଗ୍ଲାଇକୋଲାଇଟିକ୍ ଚାପ ପରୀକ୍ଷା ବାହ୍ୟ କୋଷୀୟ ଏସିଡିଫିକେସନ୍ (ECAR) ସ୍ତର ମାପ କରେ। ପରୀକ୍ଷାରେ, ECAR ଦ୍ୱାରା ମାପ କରାଯାଇଥିବା ସେଲ୍ୟୁଲାର ଗ୍ଲାଇକୋଲାଇଟିକ୍ କ୍ଷମତା ପରୀକ୍ଷା କରିବା ପାଇଁ ଗ୍ଲୁକୋଜ୍, ଅଲିଗୋମାଇସିନ୍ A, ଏବଂ 2-DG କ୍ରମାଗତ ଭାବରେ ପ୍ରଶାସିତ ହୋଇଥିଲା।
ନନ୍-ଟାର୍ଗେଟିଂ କଣ୍ଟ୍ରୋଲ୍ (NC) ଏବଂ shSLC7A5 (Sh1, Sh2) ସହିତ ଟ୍ରାନ୍ସଫେକ୍ଟ ହୋଇଥିବା A549 କୋଷଗୁଡ଼ିକୁ 10 ସେମି ବ୍ୟାସ ପାତ୍ରରେ ରାତାରାତି ପ୍ଲେଟେଡ୍ କରାଯାଇଥିଲା। କୋଷ ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ସକୁ 1 ମିଲି ବରଫ-ଥଣ୍ଡା 80% ଜଳୀୟ ମିଥାନଲ୍ ସହିତ ବାହାର କରାଯାଇଥିଲା। ମିଥାନଲ୍ ଦ୍ରବଣରେ ଥିବା କୋଷଗୁଡ଼ିକୁ ସ୍କ୍ରାପ୍ କରାଯାଇଥିଲା, ଏକ ନୂତନ ଟ୍ୟୁବ୍ ରେ ସଂଗ୍ରହ କରାଯାଇଥିଲା, ଏବଂ 4°C ତାପମାତ୍ରାରେ 15,000 × g ରେ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫ୍ୟୁଗ୍ କରାଯାଇଥିଲା। 800 µl ସୁପରନାଟାଣ୍ଟ ସଂଗ୍ରହ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଏକ ହାଇ-ସ୍ପିଡ୍ ଭାକ୍ୟୁମ୍ କନସେଣ୍ଟ୍ରେଟର୍ ବ୍ୟବହାର କରି ଶୁଖିଲା କରାଯାଇଥିଲା। ଉପରେ ବର୍ଣ୍ଣିତ LC-MS/MS ବ୍ୟବହାର କରି ଶୁଖିଲା ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ ପେଲେଟ୍ଗୁଡ଼ିକୁ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍ ସ୍ତର ପାଇଁ ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥିଲା। A549 କୋଷ (NC ଏବଂ shSLC7A5) ରେ ସେଲ୍ୟୁଲାର୍ NAD(H) ସ୍ତରଗୁଡ଼ିକୁ ଏକ ପରିମାଣାତ୍ମକ NAD+/NADH କଲରିମେଟ୍ରିକ୍ କିଟ୍ (#K337, ବାୟୋଭିଜନ) ବ୍ୟବହାର କରି ନିର୍ମାତାଙ୍କ ନିର୍ଦ୍ଦେଶ ଅନୁଯାୟୀ ମାପ କରାଯାଇଥିଲା। ମେଟାବୋଲାଇଟ୍ସର ପରିମାଣକୁ ସ୍ୱାଭାବିକ କରିବା ପାଇଁ ପ୍ରତ୍ୟେକ ନମୁନା ପାଇଁ ପ୍ରୋଟିନ୍ ସ୍ତର ମାପ କରାଯାଇଥିଲା।
ନମୁନା ଆକାର ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ଭାବରେ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରିବା ପାଇଁ କୌଣସି ପରିସଂଖ୍ୟାନ ପଦ୍ଧତି ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇ ନଥିଲା। ବାୟୋମାର୍କର ଆବିଷ୍କାର ପାଇଁ ଲକ୍ଷ୍ୟ ରଖାଯାଇଥିବା ପୂର୍ବ ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ସ ଅଧ୍ୟୟନ 15,18 ଆକାର ନିର୍ଣ୍ଣୟ ପାଇଁ ମାନଦଣ୍ଡ ଭାବରେ ବିବେଚନା କରାଯାଇଛି, ଏବଂ ଏହି ରିପୋର୍ଟଗୁଡ଼ିକ ତୁଳନାରେ, ଆମର ନମୁନା ପର୍ଯ୍ୟାପ୍ତ ଥିଲା। ଅଧ୍ୟୟନ ଗୋଷ୍ଠୀରୁ କୌଣସି ନମୁନା ବାଦ ଦିଆଯାଇ ନଥିଲା। ଲକ୍ଷ୍ୟହୀନ ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ସ ଅଧ୍ୟୟନ ପାଇଁ ସେରମ୍ ନମୁନାଗୁଡ଼ିକୁ ଏକ ଆବିଷ୍କାର ଗୋଷ୍ଠୀ (306 ମାମଲା, 74.6%) ଏବଂ ଏକ ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ବୈଧତା ଗୋଷ୍ଠୀ (104 ମାମଲା, 25.4%) କୁ ଅନିୟମିତ ଭାବରେ ନ୍ୟସ୍ତ କରାଯାଇଥିଲା। ଆମେ ଲକ୍ଷ୍ୟହୀନ ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ସ ଅଧ୍ୟୟନ ପାଇଁ ଆବିଷ୍କାର ସେଟ୍ ରୁ ପ୍ରତ୍ୟେକ ଗୋଷ୍ଠୀରୁ 70 ଟି ମାମଲା ମଧ୍ୟ ଅନିୟମିତ ଭାବରେ ଚୟନ କରିଥିଲୁ। LC-MS ତଥ୍ୟ ସଂଗ୍ରହ ଏବଂ ବିଶ୍ଳେଷଣ ସମୟରେ ତଦନ୍ତକାରୀମାନଙ୍କୁ ଗୋଷ୍ଠୀ ନିଯୁକ୍ତି ପାଇଁ ଅନ୍ଧ କରାଯାଇଥିଲା। ମେଟାବୋଲୋମିକ୍ସ ତଥ୍ୟ ଏବଂ କୋଷ ପରୀକ୍ଷଣର ପରିସଂଖ୍ୟାନ ବିଶ୍ଳେଷଣ ସମ୍ପୃକ୍ତ ଫଳାଫଳ, ଚିତ୍ର କିମ୍ବଦନ୍ତୀ ଏବଂ ପଦ୍ଧତି ବିଭାଗରେ ବର୍ଣ୍ଣିତ କରାଯାଇଛି। ସମାନ ଫଳାଫଳ ସହିତ ସେଲ୍ୟୁଲାର୍ ଟ୍ରିପ୍ଟୋଫାନ୍, NADT ଏବଂ ଗ୍ଲାଇକୋଲାଇଟିକ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପର ପରିମାଣ ତିନିଥର ସ୍ୱାଧୀନ ଭାବରେ କରାଯାଇଥିଲା।
ଅଧ୍ୟୟନ ଡିଜାଇନ୍ ବିଷୟରେ ଅଧିକ ସୂଚନା ପାଇଁ, ଏହି ଆର୍ଟିକିଲ୍ ସହିତ ଜଡିତ ପ୍ରାକୃତିକ ପୋର୍ଟଫୋଲିଓ ରିପୋର୍ଟ ସାରାଂଶ ଦେଖନ୍ତୁ।
ନିଷ୍କାସିତ ବୈଶିଷ୍ଟ୍ୟଗୁଡ଼ିକର କଞ୍ଚା MS ତଥ୍ୟ ଏବଂ ରେଫରେନ୍ସ ସେରମର ସାଧାରଣକୃତ MS ତଥ୍ୟ ଯଥାକ୍ରମେ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ତଥ୍ୟ 1 ଏବଂ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ତଥ୍ୟ 2 ରେ ଦର୍ଶାଯାଇଛି। ପାର୍ଥକ୍ୟ ବୈଶିଷ୍ଟ୍ୟଗୁଡ଼ିକ ପାଇଁ ଶିଖର ବ୍ୟାଖ୍ୟାଗୁଡ଼ିକ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ତଥ୍ୟ 3 ରେ ଉପସ୍ଥାପିତ ହୋଇଛି। LUAD TCGA ଡାଟାସେଟ୍ https://portal.gdc.cancer.gov/ ରୁ ଡାଉନଲୋଡ୍ କରାଯାଇପାରିବ। ଗ୍ରାଫ୍ ପ୍ଲଟ୍ କରିବା ପାଇଁ ଇନପୁଟ୍ ତଥ୍ୟ ଉତ୍ସ ତଥ୍ୟରେ ପ୍ରଦାନ କରାଯାଇଛି। ଏହି ଆର୍ଟିକିଲ୍ ପାଇଁ ଉତ୍ସ ତଥ୍ୟ ପ୍ରଦାନ କରାଯାଇଛି।
ଜାତୀୟ ଫୁସଫୁସ ସ୍କ୍ରିନିଂ ଅଧ୍ୟୟନ ଗୋଷ୍ଠୀ, ଇତ୍ୟାଦି। କମ ଡୋଜ୍ ଗଣନା କରାଯାଇଥିବା ଟୋମୋଗ୍ରାଫି ସହିତ ଫୁସଫୁସ କର୍କଟ ମୃତ୍ୟୁହାର ହ୍ରାସ। ଉତ୍ତର ଇଂଲଣ୍ଡ। ଜେ. ମେଡ. 365, 395–409 (2011)।
କ୍ରାମର, ବିଏସ, ବର୍ଗ, କେଡି, ଆବରଲେ, ଡିଆର ଏବଂ ପ୍ରୋଫେଟ୍, ପିସି କମ୍ ଡୋଜ୍ ହେଲିକାଲ୍ ସିଟି ବ୍ୟବହାର କରି ଫୁସଫୁସ କର୍କଟ ସ୍କ୍ରିନିଂ: ଜାତୀୟ ଫୁସଫୁସ ସ୍କ୍ରିନିଂ ଅଧ୍ୟୟନ (NLST) ରୁ ଫଳାଫଳ। ଜେ. ମେଡ. ସ୍କ୍ରିନ୍ 18, 109–111 (2011)।
ଡି କୋନିଙ୍ଗ, ଏଚ୍.ଜେ., ଏବଂ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ। ଏକ ଅନିୟମିତ ପରୀକ୍ଷଣରେ ଭଲ୍ୟୁମେଟ୍ରିକ୍ ସିଟି ସ୍କ୍ରିନିଂ ସହିତ ଫୁସଫୁସ କର୍କଟ ମୃତ୍ୟୁହାର ହ୍ରାସ। ଉତ୍ତର ଇଂଲଣ୍ଡ। ଜେ. ମେଡ୍. 382, ​​503–513 (2020)।